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第一部分 微生物的利用 实验 1 大肠杆菌的培养和分离 1. 如何操作才能尽量避免呗杂菌污染？ （1） 规范操作，符合灭菌原则：培养基、实验用具等严格灭菌 在无菌室，超净工作台上操作，在酒精灯旁操作，手、实验 服等 （2） 减少操作时间 （3） 控制培养条件：PH、温度等 2. 在培养后如何判断是否有杂菌污染？ （1） 观察菌落形态、大小等 （2） 鉴别培养基：伊红美兰 （3） 显微观察形态、结构等 （4） 染色观察等 3. 进行恒温培养时为什么要将培养皿倒置？ 防止水蒸气凝结成水滴，从培养皿盖上滴落培养基表面并扩 散，导致菌落间相互影响，不能形成单菌落，达不到实验目的。 4. 实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？ 先高压灭菌后再洗涤，废弃物经高压灭菌后再抛弃。 5. 如果分离的是转基因的大肠杆菌，如何保证不被普通的大 肠杆菌污染？ 配置选择培养基，（如含抗氨苄青霉素的培养基），筛选出转 基因工程菌。 实验 2 分离以尿素为氮源的微生物 1. 为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基？ 琼脂是未被融化的混合物，内含一定量的含氮化合物。如果 用琼脂固化培养基，会为细菌提供一定量的非尿素类氮源，这样 会在尿素固体培养基上产生大量以非尿素为氮源的细菌，不利于 以尿素为氮源的而细菌的筛选，故而用经纯化的琼脂糖而不用琼 脂作固化剂。 2. 有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？ 如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下会被水解，水 解后的氨使土壤变成碱性，氨与其他阴离子物质如 SO2-4 、CO2-3 、 NO -3 等形成化合物，则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃 物和动物尸体分解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的 循环。 3. 有脲酶的细菌菌落周围为什么有着色的环带出现？ 细菌向胞外分泌脲酶，使培养基中中的尿素分解，尿素分解 后产生氨，氨为碱性，酚红在酸性环境中为黄色，在碱性环境中变 为红色。培养基中的酸碱指示剂产生颜色变化（变红），标志着攒脲 酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株可以以尿素为氮源。红色 环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越 大，表明菌株利用尿素的能力越强。 4. 与全培养基上的菌落数比较，为什么尿素培养基上只有少 数菌落？ 实验 3 观察土壤中能水解纤维素的微生物 1. 本实验为什么不用滤纸，而用卷烟纸？ 木质素可抑制纤维素酶的活力。卷烟纸通常不含有木质素，因 木质素所含的苯酚类物质对人体有害。当然，质量差的卷烟纸不 一定不含木质素。我们用铝制崩溃法测定纤维素酶活力，也取得 了良好的结果，因为化学分析用的无灰滤纸也不含木质素。滤纸 有输送及吸水性好于卷烟纸的优点，更易于被纤维素酶作用，因 此，没有质量好的卷烟纸 ，也可用无灰滤纸进行实验。严格不含 木质素的纸，也可防止产生木质素酶的菌的作用，这种作用会影 响观察结果。 2. 为什么只有分解纤维素的微生物生长在卷烟纸上？ 严格的说，卷烟纸是只含纤维素而不含其它物质的。纤维素 是这种微生物可利用的碳源和能源。因此，只有能分泌纤维素酶 并以纤维素为碳源和能源的微生物才能生长在卷烟纸上。 3. 你认为分解纤维素的微生物通常是细菌、霉菌还是酵母？ 为什么？ “细菌吃荤，霉菌吃素”，也就是说，细菌多以蛋白质水解物为 它的能源，而霉菌多以糖或多糖的水解物为能源。因此，分解纤维 素的菌通常是霉菌。酵母通常不含纤维素、淀粉酶等水解酶，只利 用单糖或双糖等作为碳源和能源。 4. 含有纤维素酶非得菌种可能有哪些应用价值 ？ 纤维素的用途 “纤维素酶的用途”一节中已作了叙述。除此之外， 纤维素酶在生态循环中也起重要作用，他可以水解森林中自然淘汰 的树枝和砍伐的树