实验十五尿液淀粉酶活力测定氏法.pptVIP

实验十五 尿液淀粉酶活力测定 ( Winslow)氏法 原理: ■临床上通常用 Winslow氏法测定尿或血清 中淀粉酶活性。该法对淀粉酶活性单位的 规定是:在37℃,30分钟,恰好能将0.1% 淀粉溶液1m1水解(指加入碘液后不再呈 兰色或红色)的酶量定为一个活力单位。 试剂与器材: 10.9%NaC1; 2.0.1%淀粉; ■3.碘化钾一碘溶液(20KI和10g碘溶于 100m1水中,使用前稀释10倍) ■4.移液管 ■5试管; 6恒温水溶锅。 操作 1.取10支试管,按次序记上号码,各加0.9% Nacl m 2.用1m1移液管加尿液1m1于第一管,使其与 0.9%;NaC1混合(若尿液中含淀粉酶过多,应 预先将尿液适当稀释)。用移液管吸取,然后 任其流出。反复三次,使全管混匀。 从第一管吸出1m1到第二管中,混匀。吸出1m1 到第三管.依次类推。到第九管吸出1m1弃之。 这样即可获得分别含有尿液1/2、1/4、118.1/ 512m1的不同浓度的尿稀释液,第10管不加尿 液作为对照管。 3.将10支试管置冰水溶中,然后从第10管起 依次迅速准确加入0.1%淀粉液1m1。迅速摇 匀。立即从冰水浴中取出,置37℃,并记录 时间。注意保持水浴的温度 ■4.保温30分钟后,取出各管,。迅速浸入冰 水浴中冷却。然后向各管中加稀碘液2滴摇 匀。观察各管的颜色。各试管中出现黄到