免疫荧光双标操作方法及注意事项(可编辑).pdfVIP

免疫荧光双标操作方法及注意事项(可编辑).pdf

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在同一组织细胞标本上需要同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染 色。双重免疫 荧 光 标 记 法 (double immunofluorescence labeling method)也分为直接法和间接法。 (1)直接法双重免疫荧光标记 : 标记有两种不同荧光素的抗体(如抗 A 和抗 B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光 抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种 抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。 (2)间接法双重免疫荧光标记 :用未标记的两种特异性第一抗体孵育组织 或细胞,洗去多余的第一抗体后,再用两种不同的

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