采样方法(手和皮肤黏膜消毒效果监测).docxVIP

3.17.6 手和皮肤黏膜消毒效果监测3.17.6.1 采样时间 :在消毒后立即采样。3.17.6.2 采样方法 (1) 手的采样 :被检人五指并拢， 用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈 面从指根到指端往返涂擦 2 次 (一只手涂擦面积约 30cm2)，并随之转动采样棉拭子，剪去 操作者手接触部位，将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。 (2) 皮肤粘膜采样 :用 5cm× 5cm 的标准灭菌规格板， 放在被检皮肤处， 用浸有含相应中 和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转动棉拭 子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml 含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内，立即 送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。 3.17.6.3 检测方法 (1) 细菌总数检测 :将采样管在混匀器上振荡 20s或用力振打 80 次，用无菌吸管吸取 1.0ml 待检样品接种于灭菌平皿，每一样本接种 2个平皿，内加入已溶化的 45℃～ 48℃ 的 营养琼脂 15ml ～ 18ml ，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置 36℃± 1℃温箱培养 48h，计数菌 落数。 采样结果计算方法： 平板上菌落数 × 稀释倍数 细菌总数 (cfu/cm 2)＝─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ ─ 采样面积 (cm2) (2) 致病菌检测 : 按3.17.15的原则执行。 3.17.6.4 结果判定 (1) 消毒洗手 Ⅰ、Ⅱ类区域工作人员：细菌总数≤ 5cfu/cm 2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 铜绿假单孢菌为消毒合格。 Ⅲ类区域工作人员：细菌总数≤  10cfu/cm 2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消 毒合格。 Ⅳ类区域工作人员：细菌总数≤  15cfu/cm 2，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消 毒合格。 母婴同室、 婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上，  不得检出沙门菌、 大肠杆菌、 溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。 (2)皮肤黏膜 :参照手的卫生学标准执行。 3.17.6.5 注意事项 皮肤粘膜采样处，若表面不足 5cm× 5cm 可用相应面积的规格板采样。 3.17.7 物品和环境表面消毒效果的监测 3.17.7.1 采样时间 :在消毒处理后进行采样。 3.17.7.2 采样方法 :用 5cm× 5cm 的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥ 100cm2 ，连续采样 4 个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子 1 支，在规格板内 横竖往返均匀涂擦各 5 次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入 10ml 含 相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。 门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。 3.17.7.3 检测方法 (1) 细菌总数检测 :检测方法按 3.17.6.3（ 1） 执行。小型物体表面的结果计算，  用 cfu/ 件表示。 (2) 致病菌检测 : 检测方法按 3.17.15 原则执行。 3.17.7.4 结果判定 Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤ 5cfu/cm 2，并未检出致病菌为消毒合格。 Ⅲ类区域细菌：总数≤ 10cfu/cm 2，并未检出致病菌为消毒合格。 Ⅳ类区域细菌：总数≤ 15cfu/cm 2，并未检出致病菌为消毒合格。 母婴同室、早产儿室、婴儿室、 新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门菌。 3.17.7.5 注意事项 (1) 采样时间 :按 3.17.5.1 执行。 (2) 样本量及处理 :按 3.17.5.2(1) 执行。 3.17.8 空气消毒效果的监测 3.17.8.1 采样时间 :在消毒处理后、操作前进行采样。 3.17.8.2 采样方法：平板暴露法 (1) 布点方法 :室内面积≤ 30m2，设内、中、外对角线 3点，内、外点布点部位距墙壁  1M 处；室内面积＞ 30m2，设 4 角及中央 5 点， 4 角的布点部位距墙壁 1m 处。 (2) 采样方法 :将普通营养琼脂平板 (直径为 9cm)放在室内各采样点处， 采样高度为距地 面 1.5m 采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露 5min ，盖好立即送检。 3.17.8.3 检测方法 :按照 2.1.3 要求进行。 平板暴露法结果计算公式： 细菌总数（ cfu/m 3） =50000N/ （ A × T） 式中 A 为平板面积（ cm2）； T为平板暴露时间（ min ）； N