血液一般检测步骤.pdfVIP

血液一般检测 （一） 红细胞计数（ Blood Cell Count ） 1. 计数板结构 ※计数池 =9 个大方格，每个大方格长宽均为 1mm，深 0.1mm 中央大方格双线分隔为 25 个中方格 （用于红细胞计数），周边大方格单线分隔 为 16 个中方格（用于白细胞计数） 3 ※体积计算：每个大方格体积 =1×1×0.1=0.1mm 即 0.1ul ，5 个中方格体积× 5=1 个大方格体积 ※计数：计数 5 个中方格体积 （即中央大方格四角 +中央的中方格， 标 “红”字处） 公式：每升血液中红细胞数目 =五个中方格内红细胞个数× 5 （1 个大方格体积， 6 即 0.1ul 内 RBC数）× 10 （1ul 内 RBC数）× 10 （1L 内 RBC数）×200 （稀释倍数） 2、操作 （1）、取血 a、选择耳垂边缘或手指肚， 用 75%酒精棉球消毒局部皮肤， 用消毒后的刺血针 刺入皮肤，深约 2 毫米，用干棉球擦去第一滴血。 b、轻轻挤压， 使血液流出形成绿豆大小的血滴。 操作者用右手平拿取血吸管尖 端浸入血滴中，缓缓吸血，吸至“ 10”刻度处，用干棉球擦净吸管外沾附的 血液。 （2 ）、稀释及混匀 ： a、事先准备两根清洁小试管，精确滴入红细胞稀释液 1.99 亳升。 1 b、将取好的血液立即挤入上述试管中，并来回吸取小量稀释液数次。 c 、摇动试管，充分混匀。此时血液被稀释 200 倍。 （3 ）、充池 a、先将计数板及盖玻片擦干净，并将盖玻片复盖于计数池上面。 b、用吸管吸取已充分混匀的稀释血液一滴， 滴入盖玻片的下方边缘处， 稀释血 液即充填入计数池中。 c 、静置 2-3 分钟，待细胞完全下沉稳定后进行计数。 （4 ）红细胞计数 ①平放计数板于显微镜台上，先用低倍镜找到计数池的中央大方格。再转换高 倍镜计数。 ③计数 5 个中方格（即四角的及中央的中方格） 。 每升血液中红细胞数目 =五个中方格内红细胞个数× 5 （变为0.1ul ）×10 （变 6 为 1ul ）× 10 （变为1L）×200 （稀释倍数） （二）、白细胞分类 1、血涂片的制作 （1）从采血针眼处挤出绿豆大小血滴，用清洁玻片面一端轻轻按触血滴，使血 滴附于玻片上。 （2）取推玻片一端接触血滴，使血滴延推片边缘均匀展开，使推片与玻片保持 30 至 45 度角，稍加压力，均匀快速将推片由玻片表面一端推至另一端，形成 头体尾明显的舌形，待其干燥。 2、染色 （1）、取已干燥的血涂片，用蜡笔在血膜两端划线。 （2 ）、将血涂片平放，用滴管吸取瑞氏染液，滴 2-3 滴于波片上，轻晃使之均匀 分布整个血膜，再加入等量缓冲液，轻晃混匀，放置十分钟待染色完全。 （3 ）、用小流水自片端冲去染液，待干燥。 3、显微镜检查 先用低倍镜观察全片，了解涂片染色、细胞分布情况，选择细胞分布均匀的部分 （常在血膜体尾交界部），转油镜按一