分子生物学题库3讲课稿.pdf

__________________________________________________ 七、问答题 1．阐述原核生物的转录终止。 (1)转录终止的两种主要的机制是什么? (2)描述翻译怎样能调节转录终止。 (3)为什么在细菌转录终止中很少涉及到 Pho 因子? (4)怎样能阻止转录的终止? 2．复制 DNA 的聚合酶(DNA依赖的 DNA 聚合酶)也有校正功能，解释为什么 RNA 聚合酶没有这种功能。 3．讨论原核生物基因表达的聚合作用反应定向的重要性。假如核糖体从 3’端到 5’端读它的模板 mRNA 的话，那么将会发生什么情况? 4．概括细菌细胞内的转录过程。 5. 概括典型原核生物启动子的结构和功能，并解释什么是保守序列。 6．转录如何在基因或基因组末端终止? 7．(1)如何区分由启动子起始转录的 RNA 片段与 5’端被加工过的 RNA 片段; (2)证明多肽是从氨基端到羧基端方向合成的。 8．比较 E．coli rRNA 和 tRNA 的转录和加工。 9．区别可诱导和可阻遏的基因调控。 10．衰减作用如何调控E. coli 中色氨酸操纵子的表达? 11．比较并指出细菌和真核生物RNA 翻译机理的异同。 12．什么是摇摆假说? 13．指出E.coli 和真核生物翻译起始的不同。 14．S．N Cohen 于 1973 年构建了三个重组体， pSC102， pSC105， pSC109 请说明这三个重组体是如何获 得的?各说明了什么? 15．基因克隆是如何使含有单个基因的 DNA 片段得到纯化的? 16．什么是细菌的限制—修饰系统 (restriction-modificaton system, R-M system) 17．细菌的限制—修饰系统有什么意义? 18．说明限制性内切核酸酶的命名原则要点。 19．Ⅰ类限制酶具有哪些特点?在基因工程中有什么作用? 20．Ⅲ类限制酶有哪些特点? 21．何谓限制性内切核酸酶的切割频率? 22．什么是限制性内切核酸酶的星号活性?受哪些因素影响? 23．双酶消化法(double digests)绘制限制性内切核酸酶酶谱的原理。 24．什么是 DNA 多态性(DNA polymorphism)? 25．限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism，RFLP)。 26．计算下列三种酶各自在某染色体 DNA 序列上识别位点间的平均距离： Alu Ⅰ：5’AGCT 3” EcoR Ⅰ: 5’GAATTC 3’ 3 TCGA 5’ 3’CTTAGG 5’ Acy Ⅰ:5’GPuCGPyC 3’ 3’CPyGCPu5’ (注： Py=任何一种嘧啶； Pu=任何一种嘌呤) 收集于网络，如有侵权请联系管理员删除 __________________________________________________ 图 15.2 用 EcoR Ⅰ、Hpa Ⅱ单独切割及用这两种酶混合切割30kb BamH Ⅰ片段产生的 DNA 带 图 15.1 酶切电泳图谱 1～2：HindⅢ 切割；3～4：ＥcoRV 切割；5～6：Hind Ⅲ+ Ｅco RV； 1、3、5 是质粒 DNA ： 2 、4 、6 是 15 号克隆。 R 27．在细菌质粒 pBP1 的四环素抗性基因 tet 的中间有一个 Hind Ⅱ的切点。用HindⅢ 切割果蝇基因组 DNA，以 pBP1 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 HindⅢ和 EcoRV 对克隆 15 进行了酶切分析，电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBP1 质粒 DNA 作对照)，旁边标出了片段的 大小。 (1)绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl 的限制性图谱，并标明四环素抗性 基因的位置—; (2)如果用克隆在另一个与 pBP1 完全不同源载体上的四环素