中国alk阳性非小细胞肺癌诊断专家共识-副本.ppt

31 常规 IHC 的抗体选择 ? 常规 IHC 敏感性高（假阴性率低），特异性低（假阳性高 ），因此 建议 IHC 阳性患者（无论 1+ ， 2+ ， 3+ ）均需 FISH 、 RT-PCR 、 Ventana IHC 确诊） E Thunissen, et al. Virchows Arch(2012)461:245-257 32 常规 IHC 与 FISH 的吻合性良好 研究 病例数 FISH IHC 3+ IHC 2+ IHC 1+ IHC 0 Yi 2011 101 阳性 8 1 1 0 阴性 0 2 20 69 Paik 2011 640 阳性 22 6 0 0 阴性 0 10 16 586 Park 2012 262 阳性 9 11 5 0 阴性 0 2 1 234 JH,Paik 2012 735 阳性 15 13 0 0 阴性 0 7 20 680 X Han 119 阳性 37 7 1 0 阴性 2 1 5 66 Total 1857 阳性 91 38 7 0 阴性 2 22 62 1635 A. J.Weickhardt, et al. Cancer. 2012 Dec 20. doi: 10.1002/cncr.27913 33 Total 1857 阳性 91 38 7 0 阴性 2 22 62 1635 ● 价格便宜， 适合于 NSCLC 患者的筛选 ● 操作流程简单、易行 ● 判读标准主观 ● 操作流程需标准化 优势 IHC （ 3+ ） 与 FISH （ + ） 符合率 98% 劣势 IHC （ 2+ ） 与 FISH （ + ） 符合率 63% IHC （ + ）与 FISH （ + ） 符合率 10% IHC （ - ）与 FISH （ - ）符 合率 100% 34 ALK 常规 IHC 与克唑替尼疗效存在相关性 E L. Kwak, et al. N Engl J Med 2010;363:1693-1703 35 IHC 阳性， FISH 阴性克唑替尼治疗有效 ● 54 岁，女性，腺癌 ● IHC 阳性（左图） ● FISH 阴性（右图） ● ROS1 与 cMET 均阴性 ● Crizotinib 250mg bid 治 疗有效，肿瘤 PR JM Sun, et al. J Thoracic Oncol, 2012 Case Report 36 IASLC/CAP/AMP ， 2013 肺癌分子检测指南 ALK IHC 检测 ，如经过仔细确认 ，可考虑作为 ALK FISH 诊断前 的 筛选方法 NI Lindeman, et al. 2012 CAP , doi: 10.5858/arpa.2012-0720-OA 37 常规手动 IHC 注意事项及判读标准 “采用 IHC 法需注意以下两点。第一，由于 ALK 的蛋白表达与神 经外胚层的分化有关，故其可能在小细胞肺癌和正常人的脑组 织中存在表达。因此，不建议在小细胞肺癌中使用 ALK 融合 蛋白的 IHC 检测。 第二， IHC 的阳性标准判定尚未统一。常规 IHC 判读标准如下： IHC 3+ ： 5% 的肿瘤细胞呈现颗粒状细胞 质强着色； IHC 2+ ： 5% 的肿瘤细胞呈现中度细胞质着色； IHC 1+ ： 5% 的肿瘤细胞呈现微弱或模糊的细胞质着色或 ≤ 5% 的肿瘤细胞有任何程度的着色； IHC 0 ：肿瘤细胞无着色 。 ” E Thunissen, et al. Virchows Arch(2012)461:245-257 38 NSCLC 活检组织标本 ? 阴性或未知； 据组织类型选择合适技术 § 新鲜标本 Ventana IHC 常规 IHC 检测 * 阳性 FISH RT-PCR ＆ （ qPCR 、多重 PCR 或 RACE-PCR-Seq ） ? EFGR 突变且使用 EGFR-TKIs 后出 现原发或继发耐药的患者 石蜡标本 3+/2+/1+ 阴性 ALK 阳性非小细胞肺癌 EGFR 突变检测 39 ALK 分离探针 FISH 原理 3-ALK 探针杂交端粒的断点大约是 300 KB ，并用橘色荧光标示。 5-ALK 探 针杂交着丝粒的断点大约是 442 kb ，并用绿色荧光标示。 Vys