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1.4 蛋白质工程的崛起 1983年Ulmer首先提出蛋白质工程这个名词。什么叫蛋白质工程?它同基因工程有何区别和联系?又是如何设计和施工的?一、蛋白质工程崛起的缘由活动1:阅读P26. 回答:为什么要进行蛋白质工程?1、基因工程的实质和不足(1)基因工程的实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,使后者产生本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。(2)基因工程的不足:在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。2、天然蛋白质的不足: 天然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它 们的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。干扰素(半胱氨酸)干扰素(丝氨酸)体外很难保存体外可以保存半年3、蛋白质工程的目的:生产符合人类生产和生活的需要的蛋白质。改造玉米中赖氨酸含量比较低玉米中赖氨酸含量可提高数倍天冬氨酸激酶(352位的苏氨酸)天冬氨酸激酶(异亮氨酸)改造二氢吡啶二羧酸合成酶(104位的天冬酰胺)二氢吡啶二羧酸合成酶(异亮氨酸)改造二、蛋白质工程的基本原理1、目标: 根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。2、原理:思考:对天然蛋白质进行改造,你认为应该直接对蛋白质分子进行操作,还是通过对基因的操作来实现? 应该从对基因的操作来实现对天然蛋白质改造,主要原因如下:(1)任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且改造过的蛋白质可以遗传下去。如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造过的蛋白质分子还是无法遗传的。(2)对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。 二、蛋白质工程的基本原理1、目标: 根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。2、原理:改造基因(基因修饰或基因合成)复制复制转录翻译DNARNA蛋白质逆转录天然蛋白质的合成遵循中心法则天然蛋白质的合成过程转录翻译DNARNA肽链折叠等具有空间结构的蛋白质表达生物特有的功能或性状遵循中心法则,并需经过高级空间结构的转变3. 途径:预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)DNA合成分子设计氨基酸序列多肽链蛋白质三维结构基因DNAmRNA转录翻译折叠预期功能生物功能图1-29蛋白质工程流程图蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程的实质是对编码蛋白质的基因进行改造蛋白质工程操作程序的基本思路与基因工程有什么不同?答:基因工程是遵循中心法则,DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质工程是按照以下思路进行的:确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列,可以创造自然界不存在的蛋白质4、基础:蛋白质的结构和功能比较基因工程和蛋白质工程基因工程蛋白质工程相同点都要改造基因,都属于分子水平产生新的基因型,无新基因基因(型)产生的蛋白质原有的新的联系蛋白质工程以基因工程为基础,是基因工程的应用和延伸五、蛋白质工程的进展和前景胰岛素速效型药品 1.进展应用于微电子方面2.前景制作电子元件效率高体积小具有 、耗电少和 的特点3.现状蛋白质工程目前成功的例子不多,原因是对蛋白质的高级结构了解不够。要设计出更加符合人类需求的蛋白质还需经过艰辛的探索。讨论:某多肽链的一段氨基酸序列是:……-丙氨酸-色氨酸-赖氨酸-甲硫氨酸-苯丙氨酸-……丙氨酸:GCU、GCC、GCA、GCG色氨酸:UGG赖氨酸:AAA、AAG甲硫氨酸:AUG苯丙氨酸:UUU、UUC 讨论:1、怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列? 请把相应的碱基序列写出来。 CGA (或G或T或C) ACCTTT(或C)TACAAA (或G)GCT (或C或A或G) TGGAAA (或G)ATGTTT (或C)mRNA序列 GCU(或C或A或G)UGGAAA(或G)AUGUUU(或C) 脱氧核苷酸 序列2.确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因(DNA)? 确定目的基因的碱基序列后,就可以根据人类的需要改造它,通过人工合成的方法或可以通过基因的定点诱变技术来改变后从基因文库中获取。思考与探究 2.基因工程是遵循中心法则, 从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能,基本上是生产出自然界已有的蛋白质。蛋白质工程是按照以下思路进行的: 确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列,可以创造自然界不存在的蛋白质。3.酶工程就是指将酶所具有的生物催化作用,借助工程
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