诊断酶学(第五版)12.pptVIP

（一）测定原理 （二）免疫化学测定的优缺点 优点主要有：①灵敏度高②特异性高 ③能用于一些不表现酶活性的酶蛋白 ④特别适用于同工酶的测定 局限性主要有：①制备足够量的提纯酶作为抗原和 具有免疫化学性质的抗血清较困难 ②测定步骤多，操作繁琐 ③测定成本高 二、酶质量测定 三、同工酶检测 (一)电泳法---琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰 胺凝胶电泳、等电聚焦电泳、 毛细管电泳 ● 用电泳法进行同工酶分析时，如显示的 区带数与同工酶数不一致时，要特别注意 巨分子酶的存在。 (二)层析法 血 清 LD 电 泳 图 谱 分 析 正常和病理状况时血清CK同工酶谱 (三)免疫分析法 免疫抑制法 利用同工酶的一种亚基与相应的抗 体结合后，酶活性受到抑制，测定加与不加抗体前后 样品中酶活性的变化，可以计算出该型同工酶的活性。 不加抗CK-MM血清时样品的CK活性：CK-MM和CK-MB活性； 加入抗CK-MM血清时样品的CK活性：50％CK-MB的活性； 加入抗CK-MM血清时样品的CK活性×2：CK-MB活性； 所测CK-MM和CK-MB之总活性－CK-MB活性＝CK-MM活性。 (四)动力学分析法 1．底物特异性分析法 2．抑制剂分析法 3．pH分析法 4．热失活分析法 (五)蛋白酶水解法 第三节 常用酶及同工酶测定的临床应用 一、血清酶 血清酶活性升高的原因： ●组织器官受损造成细胞破坏或细胞膜通透性增高，细胞内的某些酶大量释放入血； ●细胞的转换率增高或细胞的增殖加快，其特异的标志酶释放入血； ●细胞内酶的合成或诱导增强； ●酶的清除受阻。 1、血清酶的来源 （1）血浆特异酶 （2）非血浆特异酶 ①外分泌酶 ②细胞酶 2、血清酶的去路 （1）血清酶的半寿期 （2）血清酶的失活和排泄 （一）血清酶的来源与去路 （二）血清酶的生理差异 1．性别 2．年龄 3．进食 4．运动 5．妊娠 6．其他 常用的酶谱： (1)心肌酶谱---AST、LD、CK、CK-MB、CK- MB亚型或CK-MM亚型 (2)肌酶谱---LD、AST及其同工酶、CK-MM亚型 (3)肝酶谱---ALT、LD、γ-GT、ALP、ChE、MAO (4)肿瘤酶谱---ACP及其同工酶、ALP及其同工酶、 γ-GT及其同工酶、AFU、AMY及其同工酶、LPS (5)胰酶谱---AMY及其同工酶、LPS、弹力蛋白酶-1、 磷脂酶A2 （三）血清酶的临床应用 二、尿液酶 三、浆膜腔积液酶 四、脑脊液酶 五、同工酶的诊断价值 LD同工酶——心肌梗死、肝功能损伤和恶性肿瘤 CK同工酶——心肌梗死、肌肉疾病和神经系统疾病 AST同工酶——肝脏、心肌等细胞损伤程度的判断 GP同工酶——急性心肌梗死 ARS同工酶——膀胱癌 ALD同工酶——肝脏疾病、心肌梗死、神经肌肉系 统疾病和恶性肿瘤 γ-GT同工酶——肝脏占位性病变 AMS同工酶——急性胰腺炎、腮腺炎 ALP同工酶——肝胆疾病、骨骼疾病 ACP同工酶——前列腺疾病 GST 同工酶——肝脏疾病、肺癌 1、转氨酶及其同工酶 DeRitis比值（AST／ALT）——对于急、慢性肝炎的诊 断、鉴别诊断以及判断转归也有特别价值。急 性肝炎时比值＜1，肝硬化时比值≥2，肝癌时 比值≥3。 “酶胆分离”现象——重症肝炎时由于大量肝细胞坏死， 血中ALT逐渐下降，而胆红素却进行性升高，常 是肝坏死的前兆。 2、γ-谷氨酰转移酶及其同工酶 γ-GT同工酶分为γ-GT1、γ-GT2、γ-GT3和γ-GT4 四种，正常人只见γ-GT2和γ-GT3。重症肝胆疾病 和肝癌时常有γ-GT1出现，乙醇性肝坏死和胆总管 结石时常有γ-GT2增加，γ-GT4与胆红素增高密切相关。 3、肌酸激酶及其同工酶和亚型 ● 在细胞质内存在3种同工酶，即C