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第五章 转录;1957年 Crick提出了中心法测(central
dogma)
DNA → RNA→ 蛋白质
1970 Crick又作了部分修改:
;第一节 信使的发现;同年Goldstein和Plaut用同位素标记变形虫RNA前体,
发现标记的RNA在核内。
标记追踪实验:经过一段时间发现被标记的RNA在细胞质中,
此表明什么?;1956年E. Volkin和 L.Astrachan:
用同位素脉冲一追踪标记
表明T2噬菌体新合成的RNA的碱基比和DNA的碱基比相似,而和细菌的碱基比不同。由于T2感染细菌时注入的是DNA, 而在细胞里合成的是RNA。
此表明什么?;;;Jacob和Monod预言:
(1)这种“ 信使”应是一个多核苷酸;
(2)其分子平均不小于5?105bp,足以携
带一个基因的遗传信息;
(3)它们至少是暂时连在核糖体上;
(4)其碱基组成反映了DNA的序列;
(5)它们能高速更新。
Jacob和Monod将它定名为:
信使RNA(Messenger RNA)或mRNA。
;第二节 RNA的酶促合成;确定有义链;;Gene;E.coli在 0?C时需13秒钟才能加上一个核苷酸,但在37?C每秒就可加上40个核苷酸;利用这个差别以14C来标记U,在0?C培养E.coli。
提取这种正在伸长的mRNA分子
发现14C标记首先出现在伸长的3′端,因此可以证明合成是延着5′-3′方向进行的。; 二、RNA合成和DNA复制的区别; ;;;;RNA pol 执行多功能;第二节 原核生物的转录;(二)原核生物不同基因启动子有共同特点:
(1)结构典型,都含识别(R),结合(B)和起始(I)位点;
(2)序列保守; (3)位置和距离都比较恒定;
(4)直接和多聚酶相结合;
(5)常和操纵子相邻;(6)位于基因的5′端;
(7)决定转录的启动和方向。
; E.coli中不同的?因子 可识别不同的启动子;
5-9bp
;1. -10序列:;-10序列对转录的效率影响;2. -35序列;3. 转录起始位点(I)。;二、转录的起始;RNA核心酶和全酶在DNA上的分布:;;;三、转录的延伸;;四、 原核生物转录的终止;强终止子的结构; 强终止子的结构特点; N
N N
N N
G ·C
C ·G
C ·G
G ·C
C ·G
G ·C
C ·U
…NNNNC ·U UUUU…-OH 3’
强终止子结构的模式图
;;
RNA Pol转录DNA
ρ因子附着到RNA
识别位点上
ρ因子跟在RNAPol
后沿RNA移动
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