天然产物化学的第二章分离.ppt

天然产物有效成分的分离、检测和毒理学安全性与功效性评价 ;教学目的与要求：;主要内容;第一节 天然有效成分的提取 ;一、溶剂提取法 ;? ;比水重的有机溶剂：氯仿;运用溶剂提取法的关键，是选择适当的溶剂。溶剂选择适当，就可以比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点：①溶剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；②溶剂不能与中药的成分起化学变化；③溶剂要经济、易得、使用安全等。;4、各种溶剂提取法 ;浸渍法：浸渍法系将天然产物粉末或碎块装人适当的容器中，加入适宜的溶剂（如乙醇、稀醇或水），浸渍药材以溶出其中成分的方法。;;;煎煮法：煎煮法是我国最早使用的传统的浸出方法。所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪瓷器皿，不宜用铁锅，以免药液变色。直火加热时最好时常搅拌，以免局部药材受热太高，容易焦糊。有蒸汽加热设备的药厂，多采用大反应锅、大铜锅、大木桶，或水泥砌的池子中通入蒸汽加热。还可将数个煎煮器通过管道互相连接，进行连续煎浸。 ;连续回流提取法：应用挥发性有机溶剂提取天然产物有效成分，不论小型实验或大型生产，均以连续提取法为好，而且需用溶剂量较少，提取成分也较完全。实验室常用脂肪提取器或称索氏提取器。连续提取法，一般需数小时才能提取完全。提取成分受热时间较长，遇热不稳定易变化的成分不宜采用此法。 ;? ;二、 水蒸气蒸馏法 ;三 、升华法 ;四、影响提取效果的因素 ;浸出温度：温度增加可增大可溶性成分的溶解度、扩散系数。扩散速度加快有利于浸提，并且温度适当升高，可使原料中的蛋白质凝固、酶破坏而增加浸提液的稳定性，但温度过高，会破坏不赖热的成分，并且导致浸提液的品质劣变。提取的杂质含量增高，给后道精制工序带来困难，一般浸出温度控制在60~100℃。 ;第二节 天然产物有效成分 的分离与精制 ;一、根据物质溶解度差别进行分离 ;（3）结晶溶液的制备 ：制备结晶的溶液，需要成 为过饱和的溶液。 ;2、溶剂沉淀： 在溶液中加入另一种溶剂以改变混合溶剂的极性，使一部分物质沉淀析出，从而实现分离。 ;二、根据物质在两相溶剂中的分配比 不同进行分离 ;3、 分配比与pH ;使该酸性物质完全游离，即使A-均转变成HA，则： ;一般 pH<3时，酸性物质多呈非离解状态(HA)、碱性物质则呈离解状态 (BH+) 存在，但pH>12,则酸性物质呈离解状态(A-)、碱性物质则呈非离解状态(B)存在。据此,可采用图1-1所示在不同pH的缓冲溶液与有机溶剂中进行分配的方法,使酸性、碱性、中性及两性物质得以分离。 ;两相溶剂萃取在操作中还要注意以下几点：;4）一般萃取3～4次即可。但亲水性较大的成分不易转入有机溶剂层时，须增加萃取次数，或改变萃取溶剂。 ;(1) 超临界流体萃取的特点 ;（2）超临界流体萃取的应用 ;5. 逆流分溶法(CCD) ;CCD 法因为操作条件温和、试样容易回收,故特别适于中等极性、不稳定物质的分离。另外,溶质浓度越低,分离效果越好。但是,试样极性过大或过小,或分配系数受浓度或温度影响过大时则不易采用此法分离。易于乳化的萃取溶剂系统也不宜采用。 ;6、液液分配色谱柱 ;（2）加压液相柱色谱;三、根据物质的吸附性质差别进行分离 ;化学吸附(chemical absorption),如黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附,或生物碱被酸性硅胶吸附等吸附质与吸附剂之间要发生化学反应的一类吸附。 特点：①具有选择性、 ②吸附十分牢固、有时甚至不可逆,故用得较少。;1. 物理吸附基本规律 ; (3)溶质即使被硅胶、氧化铝吸附,但一旦加入极性较强的溶剂时,又可被后者置换洗脱下来。;2、 极性及其强弱判断 ; （3）、大体上溶剂极性的大小可以根据介电常数(ε) 的大小来判断。介电常数越大，则极性越大。一般溶剂的介电常数按下列顺序增大： 环己烷（1.88），苯（2.29），无水乙醚（4.47），氯仿（5.20），乙酸乙酯（6.11），乙醇（26.0），甲醇（31.2），水（81.0） ;;4. 吸附柱色谱法用于物质的分离 ;(2) 硅胶、氧化铝吸附柱色谱,应尽可能选用极性小的溶剂装柱和溶解试样,以利试样在吸附剂柱上形成狭窄的原始谱带。 ;5. 聚酰胺吸附色谱法 ;一般认为是通过分子中的酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基,或酰胺键上的游离胺基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。至于吸附强弱则取决于各种化合物与之形成氢键缔合的能力。通常在含水溶剂中大致有下列规律: ; ③分子中芳香化程度高者,则吸附性增强；反之,则减弱。如：;（2）聚酰胺柱的洗脱;6. 大孔吸附树脂 ;（4）洗脱液的选择 ;四、 根据物质