玉米茎尖再生转化体系的建立.docxVIP

玉米茎尖再生转化体系的建立 迄今为止，组织培养技术已经成为玉米转基因遗传育种的重要方法。 转基因 育种的成功首先需要的是一个成功高效的再生转化体系， 本实验致力于建立一个 完善的玉米茎尖再生转化体系，并取得了成功。 目前幼胚仍然是玉米转基因育种的首选材料， 但幼胚的取材受时节和数量的 限制，而茎尖分生组织与之相比在这些方面上则更有优势。 这就为选用玉米茎尖 分生组织作为外植体， 建立再生转化体系提供了可能， 但是茎尖分生组织受到严 格的基因型限制，是比较难于诱导出愈伤组织并再生出植株的外植体。 因此，本研究首要的工作是从众多的基因型中选出再生能力较强的材料， 再 由这些材料建立高效的再生转化体系， 经过了大量的筛选工作和团队的努力工作， 现将取得的研究结果汇报如下： 1、筛选了 31 个基因型的玉米茎尖分生组织。 在 筛选的过程中， 根据各个阶段受试材料的实验数据， 包括诱导愈伤、 继代培养和 分化再生的性状表现，将这些材料进行分组，并成功地筛选出了李辽宁、 IRF315、 MZ17和 HI- Ⅱ4 个适合茎尖分生组织再生的基因型，在这 4 个基因型中，以杂交 HI- Ⅱ的胚性愈伤诱导效率最高，达到了 80.58 ％，其余的三个自交系品种也都分别达到了较为理想的 27.03 ％、 42.97 ％和 63.83 ％。 2、证实了由茎尖诱导的胚性愈伤组织同样也可以在培养幼胚的继代培养基 上生长良好， 迅速增殖，突破了茎尖培养与幼胚培养在培养基上的限制， 减少了 人力和原料的浪费。将这些茎尖来源的胚性愈伤组织转移到添加有3mg/L6-BA 的幼胚的分化培养基上后，均获得了较高的再生效率，分别达到了 91.5 ％、 92.9 ％、 75%和 96.6 ％，其中仍以 HI- Ⅱ的再生率最高，也进一步的证实了杂交 品种在玉米组织培养中的优越性。 3、在建立茎尖分生组织再生转化体系的过程中，详细地观察分析了各个阶 段愈伤组织的切片结果。 结果发现，整个过程中愈伤的形成需要经历初级愈伤组 织、次级愈伤组织和胚性愈伤组织三个阶段， 其中次级愈伤组织处在初级愈伤组 织向胚性愈伤组织转型的过渡阶段， 因此它的培养研究工作非常重要， 直接关系 到胚性愈伤组织能否高质高量的形成； 另外，本研究还发现， 不论是茎尖来源的 胚性愈伤组织还是幼胚来源的胚性愈伤组织， 它们在细胞的结构和特点上是完全 相同的。