细胞生物学：第九章 核 糖 体.docVIP

第九章 核 糖 体 第一节 核糖体的类型与结构 核糖体是合成蛋白质的细胞器，其唯一的功能是按照mRNA的指令由氨基酸高效且精确地合成多肽链。 核糖体几乎存在于一切细胞内，不论是原核细胞还是真核细胞，均含有大量的核糖体。线粒体和叶绿体中也含有核糖体。目前，仅发现在哺乳动物成熟的红细胞等极个别高度分化的细胞内没有核糖体。 核糖体是一种颗粒状的结构，没有被膜包裹，其直径为25 nm，主要成分是蛋白质与RNA。核糖体RNA称为rRNA，蛋白质称r蛋白，蛋白质含量约占 40％，RNA约占60％。r蛋白分子主要分布在核糖体的表面，而rRNA则位于内部，二者靠非共价键结合在一起。 一、核糖体的基本类型与成分 生物有机体细胞内有两种基本类型的核糖体：一种是70S(S为Svedberg沉降系数单位)的核糖体，其相对分子质量为2 500X103，原核细胞的核糖体为 70S，真核细胞线粒体与叶绿体内的核糖体也近似于70S；另一种是80S的核糖体，相对分子质量为4 800X103，真核细胞的核糖体(除线粒体与叶绿体核糖体外)均为80S。不论70S或80S的核糖体，均由大小不同的两个亚单位(sub— unit)构成(图9—1)。体外实验表明70S的核糖体在Mg2’浓度小于1 mmol／L的溶液中，易离解为50S与30S的大小亚单位，当溶液中Mg2’浓度大于 10mmol／L时，两个核糖体常常形成100S的二聚体。 核糖体大小亚单位在细胞内常常游离于细胞质基质中，只有当小亚单位与 mRNA结合后大亚单位才与小亚单位结合形成完整的核糖体。肽链合成终止后，大小亚单位解离，又游离存在于细胞质基质中。 核糖体蛋白质与rRNA的功能核糖体上具有一系列与蛋白质合成有关的结合位点与催化位点(图9 与mRNA的结合位点； 与新掺人的氨酰tRNA的结合位点——氨酰基位点，又称A位点； 与延伸中的肽酰tRNA的结合位点——肽酰基位点，又称P位点； (4)肽酰转移后与即将释放的tRNA的结合位点——E位点； (5)与肽酰tRNA从A位点转移到P位点有关的转移酶(即延伸因子EF G)的结合位点； (6)肽酰转移酶的催化位点。 此外还有与蛋白质合成有关的其他起始因子、延伸因子和终止因子的结合位点。对这些结合位点位于核糖体的哪个亚单位上及其确切位点，近年来已有比较多的了解。 已知与tRNA结合的P位点、A位点或E位点各自都涉及一套rRNA上不同的区域。16SrRNA与tRNA同P位点和A位点的结合有关；23SrRNA与 tRNA同P位点、A位点和E位点的结合有关。例如与tRNA结合的A位点，在 16SrRNA中主要位于530和1 400／1 500区域两部分(数码指rRNA核苷酸序号)，这也是16S rRNA两个最保守的区域，与tRNA结合最强的区域是G530， A1 492和A1 493(英文字母代表碱基种类)，其次是A1 408和G1 494。在16S rRNA和23S rRNA中与A位点、P位点或E位点有关的碱基序列几乎都是共同的保守序列。而且与各结合位点有关的——套碱基又各自不同。某些r蛋白，如小亚单位上的S2、S3和S14参与氨酰tRNA与A位点的结合；L13和L27则是大亚单位上P位点的组成成分。延伸因子EF—G和EF—Tu结合到大亚单位的一套相同位点上，位于23SrRNA2 660区域的共同保守序列，特别是与 G2 655、A2 660和G2 661结合更为紧密，这些区域也涉及到r蛋白Lll和 L7／L12，它们位于大亚单位突起的底部，均与EF—G的功能有关。在研究这些结合位点时，人们也注意到处于不同的结合条件下，核糖体的构象发生了相应的变化，而这些变化对核糖体行使其功能可能是十分必要的。 核糖体中最主要的活性部位是肽酰转移酶的催化位点。早些时候人们普遍认为既然酶的本质是蛋白质，那么核糖体中一定有某种r蛋白与蛋白质合成中的催化作用有关。虽然RNA占核糖体的60％，但长期以来它仅仅被看做是r蛋白的组织者，即形成核糖体的内部结构框架或是与蛋白质合成过程中所涉及到的RNA碱基配对有关。在对r蛋白和rRNA进行大量研究特别是利用化学方法和遗传突变株来研究r蛋白的功能以后，人们对r蛋白是否具有催化蛋白质合成的活性提出了疑问： (1)很难确定哪一种r蛋白具有催化功能，在E．coli中很多r蛋白突变甚至缺失对蛋白质合成并没有表现出“全”或“无”的影响，即并不引起蛋白质合成的完全抑制。 (2)多数抗蛋白质合成抑制剂的突变株，并非由于r蛋白的基因突变而往往是rRNA基因发生了突变。 (3)在整个进化过程中，rRNA的结构比r蛋白的结构具有更高的保守性。越来越多的事实使人们推测，rRNA在