化学肝胆生物化学检验.pptxVIP

肝胆生物化学检验;教学目标;;;;一、肝脏结构;（二 ）肝脏的显微结构特点;二、肝脏的生物化学功能 ;（一）排泄功能;（2）胆汁酸生成及种类：;（3）胆汁酸肝肠循环：;2、胆红素代谢;胆红素代谢概况;部位——肝脏细胞;（二）物质代谢功能;胆红素代谢紊乱生化;;;案例2;;血清胆红素测定;1．重氮盐改良J-G (Jendrassik and Grof method, J-G)法;【临床意义】 ;2．胆红素BOD测定法;【参考范围】;尿胆素原测定;胆汁酸代谢障碍;血清胆汁酸测定;(1) 酶比色法测定原理 ; 由于胆汁酸在血中含量低，方法检测的灵敏度达不到要求，通过增加3-氧-5β- 类固醇脱氢酶(△4-DH)，胆汁酸经3α-HSD催化的产物3-氧代胆酸在△4-DH作用下再 次脱氢，加大了NADH　的生成量，提高了反应的检测能力（见反应式1、2、3）。但 以上两种方法都存在一个缺点：生成的蓝色产物是一种染料，易于附着管壁，难于清 洗或堵塞管道。;(2) 酶比色测定法评价： ;血清胆汁酸测定的临床意义 1、总胆汁酸测定 ①肝细胞微损伤确定诊断价值指标 ②高胆红素血症与胆汁瘀积的区别 ◆ TBA测定正常而胆红素升高，可视为高胆红素血病 ◆ TBA升高，胆红素正常为胆汁瘀积 ◆ 两者均升高考虑为胆汁瘀积性黄疸;2、胆汁酸比值测定 ★ 胆道梗阻时，患者血清中CA和CDCA升高，以CA为主，CA/CDCA1。 ★ 肝实质细胞损坏时，血清中以CDCA为主，CD/CDCA1 因此，CA/CDCA比值可作为鉴别梗阻性病变黄疸和肝细胞病变（黄疸）的指标。;3、其它 ★ 药物：所致的中毒性肝炎、早期TBA↑ ★ 指示回肠病变或功能紊乱的指标 ★ 胆汁酸耐量试验;案例3;血浆酶紊乱检验;酶活性测定的基本知识 ;一、酶活性的概念 ;二、酶活性单位;三、酶活性单位的计算;计算公式:;四、酶促反应进程;酶量的测定：;五、酶促反应底物动力学;米-曼氏方程： ;（一）米氏常数的定义;（二）Km值的应用;表7-1 某些酶的Km值;2.反映酶与底物的亲合力 ;4.计算不同底物浓度时酶促反应速度相当于最大反应速度的比率 ;(三)Vmax的应用;(四)Km和Vmax的测定;2．Cornish-Bowden作图法 ;同工酶测定;同工酶的定义;一、同工酶产生的机理;二、同工酶的测定方法;（二）按照底物专一性不同进行鉴定;（四??按照免疫学特性不同进行分离鉴定;酶学分析在临床诊断上的应用;一、血浆酶的来源;二、酶的区域化分布;三、酶活性测定在临床诊断中的应用;血清酶测定;【参考范围】 5～25卡门氏单位 ;2. 连续监测法测定ALT ;（２） 方法评价： ①存在着两个副反应，会使测定结果偏高； A、血清中存在的α-酮酸(如丙酮酸)能消耗NADH。 B、血清中谷氨酸脱氢酶(GLDH)增高时，在有氨存在条件下，亦能消耗NADH。 ②双试剂法，因温育期长，能有效地消除干扰反应，测定准确性高，是ALT测定的首选方法； ③血清不宜反复冰冻保存，以免影响酶活性；避免使用溶血标本。 ;3.赖氏法测定AST;【参考范围】 8～28卡门氏单位 ;4．连续监测法测定AST ;（２）方法评价 ;(二)ALP测定 ;１、金氏法测定ALP;【参考范围】 成人：3～13 单位 ，儿童：5～28单位 ;2.连续监测法测定ALP;【参考范围】 　　　　男性：1～12岁 500U/L, 女性：1～12岁 500U/L 　　　　12～15岁 750U/L， 15岁 40 ～150U/L， 　　　　25岁 40～150U/L。;(三)GGT测定法 化学法（重氮反应比色法）和连续监测法。 ;(四)MAO测定 ;讨论：胆酶分离现象？;肝炎患者肝脏受损时，血清谷丙转氨酶ALT、谷草转氨酶AST和胆红素升高是同步的。但有时会出现另外一种情况，患者谷丙转氨酶升高与胆红素升高“不同步”，或是谷丙转氨酶升高远不如胆红素升高明显，即出现所谓胆酶分离现象。表明肝细胞大量坏死或淤胆型肝炎;血浆蛋白质紊乱检验;一、血浆蛋白质的组成、功能及分类;免疫功能: IgA、IgG、IgM、C3、C4、Kap、Lam、IgG subclasses 1-4、IgE、C1抑制物 肾脏功能: 白蛋白、转铁蛋白、IgG 、 a1-微球蛋白、 B2-微球蛋白、a2-巨球蛋白、 Kap-轻链、Lam-轻链、Cystatin C 炎症: CRP、a1-酸性糖蛋白、 触珠蛋白、a1-抗胰蛋白酶、铜兰蛋白、纤维蛋白原、SAA 类风湿性疾病: