细菌遗传课时.pptxVIP

一、细菌及其基因组 0.3课时 二、转化重组与作图 1.0课时 三、接合重组与作图 1.7课时 四、性导重组与作图 0.2课时 五、转导重组与作图 0.6课时 六、同源重组及其机理0.2课时;一、细菌及其基因组;1、双链环状； 2、无蛋白质包装； 3、成环短缩变粗。如E.coli 染色体1333μm，300μm成环为25μm，50环后为1.5μm。;1.合成功能突变体( anabolic functional mutants) 常见7种 met- thr- his- leu- pyr-(嘧啶) cyc-(胱氨酸) thi-(硫氨酸)等 2.分解功能突变体(catabolic functional mutants)常见7种 lac- gal- aru- mal- xyl-(木糖) rha-(鼠李糖) pdx-(吡哆醇)等 3.抗性突变体(resistant mutants) 常见3种 azir strr tonr分别抗叠氮化钠,链霉素,噬菌体突变,其野生型分别为azis strs tons 4.克隆形态突变(form mutants)常见2种 h,r分别为广寄主,速溶型突变,其野生型分别为h+ r+ 5.基础代谢突变(metabolism mutants) 抑制无义突变 su+ 野生型为su- 温度敏感突变 ts 野生型为ts+;1.重组频率高 高频重组Hfr细菌的重组率达10-2 2.突变率高，突变体 突变率多为10-6，变幅为10-4-10-7 3.易表达检测 单倍体，隐性突变易表达。基本和添加物培养基印迹法接种易鉴别。 4. 拟有性 细胞内有致育因子，能导致细菌间拟有性结合，能引起细菌间及细菌与病毒间遗传物质转移。;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;二、转化重组（transformation recombination）;三、接合重组（conjugation recombination）;接合与转化的化学鉴别 A、B混合培养有wt，添加以下物质后无wt为转化 ①DNA内切酶破坏DNA片断； ②氯霉素抑制DNA聚合酶活性； ③二硝基苯抑制能量供应，无wt时为转化，反之则反。;三、接合重组;三、接合重组;3.致育因子（fertility factor）;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;三、接合重组;5、大肠杆菌染色体呈环状;（一）性导因子（F`-factor）;1、改变受体性别 三者差异：因F `与F+均能使F-变成F+(环状DNA独立)，但Hfr不能(插入细菌基因组内 ) 2、基因高频转移 三者差异：F`与Hfr均携带细菌基因，基因随F因子高频转移；F+未携带细菌基因，F因子转移快但基因转移率低 3、受体形成部分二倍体 三者差异：F`与Hfr因携带的细菌基因，能与细菌基因组配对形成部分二倍体， F+却不能。;（三）性导(sex duction)概念与过程;（三）性导（sex duction）; 五、转导重组与作图（transduction recombinating and mapping）; ① DavisU形管分开双亲无野生型，不分开有野生型，说明是接合或性导重组。 ② DavisU形管分开双亲后有野生型，可能是转导或转化重组。添加二硝基苯、氯霉素或DNA酶后无野生型产生说明是转化重组，反之为转导重组。 ③ DavisU形管分开双亲后有野生型，添加过滤因子自身血清前有野生型、添加后无野生型为转导重组。;(三)普遍性转导 (general transduction);①普遍性：供体基因组内任一基因均有可能被转导，随机性 ②低频性：多为3×10-5 ，该频率来由： 沙门氏菌染色体约2-3千个基因，噬菌体头部能装20-30个基因，占1%；沙门氏菌中有转导能力的约0.3%。 所以，基因普遍性转导频率= 3×10-5 。;1、三 因子共导试验（three factor c