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《Princple and Technology of Genetic Engineering》《基因工程原理》; 第八章 基因工程应用实例
;第一节 全球转基因作物的推广应用 ;;第二节 转基因动物的应用;二、如何生产转基因动物
particular monoclonal antibodies (including one that is effective against a particular colon cancer). Animals mostly used for this work are pigs, cows, sheep, and goats. Transgenic animal;第三节 基因诊断与基因治疗 Medical and forensic applications of gene anipulation ;Medical diagnostics (as DNA probes and PCR for detect HIV of AIDS);Forensic diagnostics;(3)基因诊断探针
核酸分子探针是指特定的已知核酸片段,能与互补核酸序列退火杂交,用于对待测核酸样品中特定基因顺序的探测。
也是满足:(1)必须是单链,(2)带有容易被检测出来的标记物。
(4)基因诊断—生物芯片技术
从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱;从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱
通过比较、分析这两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。
基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点,将成为一项现代化诊断新技术。 ;Gene chip;Microarray technology;二、基因治疗;2.“基因病”概念: ;Gene therapy;取患者骨髓; 利用基因工程菌生产生化药物。目前已规模生产的有:胰岛素、生长激素、干扰素、乙肝疫苗等。;;传统疫苗的种类有哪些?
传统疫苗包括灭活疫苗、减毒疫苗和亚单位疫苗。
灭活疫苗是用致病的微生物或其代谢产物,接种到动物、鸡胚、组织或细胞培养物中,经生长繁殖后,用化学(丙酮、甲醛、酚等)或物理(加热、紫外线照射)等方法将病原体杀死的疫苗,因此,又称为“死”疫苗。
减毒疫苗是通过适当方法,以降低毒性或无毒的全病原体为抗原的疫苗。
天然微生物的某些成分的亚单位作为疫苗的,称为亚单位疫苗。; 基因工程疫苗还包括基因亚单位疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗、基因缺失活疫苗、合成肽疫苗和抗独特型抗体疫苗。根据它们的基本特征,也可分为活疫苗和灭活疫苗两大类。
利用基因工程技术制成的疫苗称为基因工程亚单位疫苗,可归为灭活疫苗。例如,乙型肝炎抗体疫苗,就是将乙肝抗原基因转入酵母或动物细胞,通过细胞培养大量生产乙肝抗原,该抗原作为基因工程疫苗用于乙型肝炎预防。人们甚至将乙肝抗原基因转到西红柿中,经栽培,获得转乙肝抗原基因西红柿,食用后可预防乙肝。 ;乙肝疫苗
第一代乙肝疫苗,属血源疫苗,由无症状乙型肝炎表面抗原阳性者的血浆制备而得。血源疫苗曾对防止乙肝流行发挥了重要作用,但是,疫苗的成本高、生产周期长(65周),还存在传播艾滋病和肝炎的潜在危险。
第二代乙肝疫苗,将编码乙型肝炎表面抗原的基因在哺乳动物细胞或酵母菌中高效表达,得到乙肝基因工程疫苗,接种者中约有10%不产生应答反应;另有5%~15%接种者属低应答者,低应答者不能获得完全保护作用。
第三代乙肝疫苗,乙肝病毒包膜的抗原性主要由S抗原和前S1、前S2抗原组成组成,美国Medeva制药公司利用基因重组技术,在哺乳动物细胞成功地表达了包含S抗原和前S1、前S2抗原的第三代重组疫苗,1998年用于临床,能诱导更高的血清阳转率和抗体应答反应。;其它基因工程药物;基因工程药物;基因工程试剂的高回报; 二、蛋白质工程的理论设计;不同动物胰岛素在A链中的差异 ;调节基因;⑵基因直接修饰法
将连接于质粒上的某一蛋白质的基因用酶法去除一小段,然后用合成的核苷酸片段接上,从而获得新的突变体。
已修饰过的酶有:
内酰胺酶、酪氨酰tRNA合成酶、二氢叶酸还原酶等酶蛋白。;;⑶盒式突变
1985年Wells提出的一种基因修饰技术,一次可以在一个位点上产生20种不同氨基酸的突变体,可以对蛋白质分子中重要氨基酸进行“饱和性”分析。 ;;;Forensic diagnostics;Microarray technology;Gene therapy;;其它基因工程药物;
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