神经元特异性烯醇化酶(NSE)作业指导书.pdf

XXXXXX 医院 Elecsys E 170/E 411 文件编号： LAB－OP－MY020 第 1 页，共 页 检验科免疫室 神经元特异性烯醇化酶 糖 1 版本： A/0 分析项目作业指导书 (NSE) 生效日期： 2008-02-01 1. 分析原理 采用双抗体夹心法原理，整个过程 18分钟完成。 · 第 1步： 20 μl 标本、生物素化的抗 NSE特异性的单克隆抗体和钌（ Ru）标记的抗 NSE特异性的单克隆抗体混匀，形 成夹心复合物。 · 第 2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 · 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光， 通过光电倍增管进行测定。仪器通过 2点定标曲线以及试剂条码提供的母定标曲线计算出结果。 2. 标本要求 血清：按标准常规方法采集。 o 不要使用血浆。离心 1小时。样本 15－25度稳定 6小时， 2－8度可稳定 24 小时， -20 C可稳定 3个月。只能冻融一次。不要使用 加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温。 3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料 采用罗氏原装配套试剂。 试剂： M： 链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖）， 1瓶， 6.5ml 。粒子浓度 0.72mg/ml 。含防腐剂。 R1：生物素化的抗 NSE单克隆抗体（灰盖）， 1瓶， 10ml，1.0mg/l ，磷酸缓冲液 50mmol/l ， Ph 7.2 ；含防腐剂。 2+ R2： Ru(bpy) 3 标记的抗 NSE单克隆抗体（黑盖）， 1瓶， 10ml。浓度 1.0mg/l ，磷酸缓冲液 50mmol/l ，pH 7.2, 含防腐剂。 校准品： Cal 1 阴性定标液（白盖）， 2瓶， 1ml/ 瓶 Cal 2 阳性定标液（黑盖）， 2瓶， 1ml/ 瓶 两个定标品的 NSE的浓度范围约为 0.5ng/ml 和50ng/ml ，以缓冲液 / 蛋白（小牛血清白蛋白）为基质，含叠氮钠 1%(w/w)。 质控品： Elecsys 肿瘤标志物质控品 1和2 （PreciControl Tumor Marker ）货号 其他所需材料： Elecsys E170/E411 分析仪 Elecsys NSE 稀释液货号 Elecsys 系统清洗液（ SysClean ）货号 Elecsys E411 分析仪 Elecsys 系统缓冲液（ ProCell ）货号 Elecsys 测量池清洗液（ CleanCell ）货号 Elecsys 添加剂液（ SysWash）货号 Elecsys 适配器 （Adapter for SysClean ），货号 Elecsys 反应杯（ CUP），货号 Elecsys 加样头（ TIP ），货号 Elecsys