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生物化学实验教案 生物化学实验教案 实验一蛋白质的定量测定 考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量 教学目的：学习考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量的原理和方法。进一步掌握分光光度法， 包括确定最大吸收波长，制作标准曲线，准确测定未知样品浓度，正确使用测定仪器等。 教学重点：考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量的原理；制作标准曲线，准确测定样品浓度。教学难点：确定最大吸收波长；正确利用标准曲线求得样品浓度。教学安排： 时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解15分钟；教师演示10分钟；学生进行实验120 分钟；实验讨论20分钟。共4学时。 课堂安排： 第一部分预习效果检查一、检查预习报告。二、提问 三、讨论预习思考题第二部分实验讲解一、目的要求二、实验原理三、实验材料 四、实验方法及注意事项 五、布置实验要解决的问题：样品的蛋白质浓度应该在什么范围才能使用本法 第三部分实验演示 介绍722分光光度计的操作注意事项，演示其操作方法。邀请一个同学操作，教师对其操作作出点评。第四部分实验指导 实验过程教师在实验室巡视，学生可随时提问，教师予以解答，同时及时纠正学生的错误操作。 第五部分实验讨论一、实验总结1、学生总结 2、教师总结 二、讨论实验操作之前布置的问题 教学参考文献： 1、 2、《生物化学实验》，李玉兰主编，中国医药科技出版社201*年出版。 授课教师年月日 教研室主任年月日 实验二SephadexG-50分离核黄素和丙种球蛋白 教学目的：学习和掌握分子筛凝胶层析法的原理和基本操作。学会使用SephadexG-50分 离核黄素和丙球蛋白。 教学重点：分子筛凝胶层析法的基本原理和操作技术；洗脱曲线的绘制。教学难点：分子筛凝胶层析法的基本原理和操作技术；洗脱曲线的绘制。教学安排： 时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解25分钟；教师演示20分钟；学生进行实验200 分钟；实验讨论20分钟。共6学时。 课堂安排： 第一部分预习效果检查一、检查预习报告。二、提问 三、讨论预习思考题第二部分实验讲解一、目的要求二、实验原理三、实验材料 四、实验方法及注意事项 五、带着问题做实验 ①蓝色葡聚糖除了可以测外水体积，在本实验中还有什么作用？ ②可以用哪些方法测定洗脱液中的蛋白质含量以绘制洗脱曲线？本实验选用的方法有何优缺点？如果不想造成样品的损耗，则应选用哪种方法？ 第三部分实验演示 演示装柱、上样、洗脱、卸柱以及分部收集器的使用。邀请一个同学再操作一遍，教师对其操作作出点评。第四部分实验指导 1、指导装柱，要求装好的层析主没有气泡、没有断层，不合格则重装。2、指导平衡过程和洗脱过程，发现问题及时解决。 3、柱床稳定，开始常规洗脱后，穿插介绍与本学科相关的期刊、网站介绍以及文献资料的检索和运用。 第五部分实验讨论一、实验总结1、学生总结 2、教师总结 二、讨论实验操作之前布置的问题 教学参考书： 1、 2、《生物化学实验与指导》；韦平和主编；中国医药科技出版社201*年8月出版。 授课教师年月日 教研室主任年月日 实验三凝胶电泳技术柱式不连续电泳分析丙球蛋白 教学目的：掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应 用，包括制胶、灌胶、加样、电泳、剥胶、染色及脱色等。教学重点：盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理及操作技术。教学难点：盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理及操作技术。教学安排： 时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解25分钟；教师演示30分钟；学生进行实验360 分钟；实验讨论30分钟。共10课时。 课堂安排： 第一部分预习效果检查一、检查预习报告。二、提问 三、讨论预习思考题第二部分实验讲解一、目的要求二、实验原理三、实验材料 四、实验方法及注意事项 五、带着问题做实验 ①为何要在塑料套管内加蔗糖溶液？可以换成水吗？ ②加完小孔胶及大孔胶之后，为何要加一层水？加水时动作为何要轻？③样品为何要用蔗糖溶液配制？用水配制可以吗？ 第三部分实验演示 演示制胶、灌胶、进样、接线、剥胶等过程（在实验进行的相应的时间段演示）。邀请一个同学再操作一遍，教师对其操作作出点评。第四部分实验指导 1、指导从配胶开始的各个实验环节。 2、电泳稳定地进行之后，穿插通过多媒体演示，介绍生物技术的应用。第五部分实验讨论一、实验总结1、学生总结 2、教师总结 二、讨论实验操作之前布置的问题 教学参考书： 1、 2、《生物化学实验与指导》；韦平和主编；中国医药科技出版社201*年8月出版 授课教师年月日教研室主任年月日 实验四影响酶促反应速度的因素 教学目的：观察和验证温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。 教学重点：建立考察温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性影响的方法，学会唾液淀粉酶的 提取方法。 教学难点：不同实验者合适的酶浓度的确定。教学安排： 时间分