生物制药技术微生物初级代谢产物的生物合成与调节赖氨酸的生物合成与调节.pptx

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;任务一、微生物初级代谢产物的生物合成与调节;;二、赖氨酸的生物合成与调节机制;1-谷氨酸转氨酶 2-天冬氨酸激酶 3-天冬氨酸一半醛脱氢酶 4-二氢吡啶二羧酸合成酶 5-高丝氨酸脱氢酶 6-二氢吡啶二羧酸还原酶 7-O—琥珀酰高丝氨酸转琥珀酰酶 8-高丝氨酸激酶 9-苏氨酸合成酶 ;葡萄糖生成赖氨酸的化学反应式为: ;(二)赖氨酸的生物合成代谢调节机制;①天冬氨酸激酶( AK) AKⅠ:受苏氨酸的反馈抑制,异亮氨酸的阻遏 AKⅡ:受蛋氨酸的阻遏 AKⅢ:受赖氨酸的反馈抑制 ②二氢吡啶二羧酸(DDP)合成酶(赖氨酸分支的第一个酶) DDP合成酶受赖氨酸反馈抑制。 ; ③高丝氨酸脱氢酶(HD)(通向苏氨酸、蛋氨酸分支的第一个酶) HDⅠ:受苏氨酸的反馈抑制    HDⅡ:受蛋氨酸的阻遏 ④苏氨酸脱氨酶(异亮氨酸合成途径的第一个酶) 受异亮氨酸的反馈抑制和阻遏 ; 菌种选育手段一:切断支路代谢(营养缺陷型的选育) 通过诱变使高丝氨酸脱氢酶缺失,切断通向苏氨酸、蛋氨酸的代谢流,控制高丝氨酸(或苏氨酸+蛋氨酸)量,过量积累赖氨酸。 ; 菌种选育手段二:抗结构类似物突变株的选育 通过诱变使天冬氨酸激酶编码的结构基因发生突变,对赖氨酸及结构类似物不敏感,即使有过量赖氨酸存在,该酶也不与赖氨酸或结构类似物结合,但酶活性中心不变。 优点:突变株遗传性地解除了终产物对自身合成途径的酶的调节控制,不受培养基中所要求物质浓度的影响,生产较稳定。 ; 2.黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌中的 调节机制;①天冬氨酸激酶( AK) 受苏氨酸和赖氨酸的协同反馈抑制 ②丝氨酸脱氢酶(HD)(通向苏氨酸、蛋氨酸分支的第一个酶) 受苏氨酸的反馈抑制   蛋氨酸的阻遏 ③苏氨酸脱氨酶(异亮氨酸合成途径的第一个酶) 受异亮氨酸的反馈抑制 ; 菌种选育手段一:切断支路代谢(营养缺陷型的选育) 在分支途径中,如果减少某一末端产物的浓度,常常可以积累另一末端产物。 通过诱变使高丝氨酸脱氢酶缺失,切断通向苏氨酸、蛋氨酸的代谢流,控制高丝氨酸(或???氨酸+蛋氨酸)量,过量积累赖氨酸。 ;菌种选育手段二:渗漏缺陷型 渗漏缺陷型—是一种特殊的营养缺陷型,是遗传性代谢障碍不完全的突变型。其特点是酶活力下降而不完全丧失,并能在基本培养基上少量生长。 ; 菌种选育手段三:抗结构类似物突变株的选育 通过诱变使天冬氨酸激酶编码的结构基因发生突变,对赖氨酸及结构类似物不敏感,即使有过量赖氨酸存在,该酶也不与赖氨酸或结构类似物结合,但酶活性中心不变。 优点:突变株遗传性地解除了终产物对自身合成途径的酶的调节控制,不受培养基中所要求物质浓度的影响,生产较稳定。 ;19

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