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;任务一、微生物初级代谢产物的生物合成与调节;;二、赖氨酸的生物合成与调节机制;1-谷氨酸转氨酶
2-天冬氨酸激酶
3-天冬氨酸一半醛脱氢酶
4-二氢吡啶二羧酸合成酶
5-高丝氨酸脱氢酶
6-二氢吡啶二羧酸还原酶
7-O—琥珀酰高丝氨酸转琥珀酰酶
8-高丝氨酸激酶
9-苏氨酸合成酶
;葡萄糖生成赖氨酸的化学反应式为:
;(二)赖氨酸的生物合成代谢调节机制;①天冬氨酸激酶( AK)
AKⅠ:受苏氨酸的反馈抑制,异亮氨酸的阻遏
AKⅡ:受蛋氨酸的阻遏
AKⅢ:受赖氨酸的反馈抑制
②二氢吡啶二羧酸(DDP)合成酶(赖氨酸分支的第一个酶)
DDP合成酶受赖氨酸反馈抑制。
;
③高丝氨酸脱氢酶(HD)(通向苏氨酸、蛋氨酸分支的第一个酶)
HDⅠ:受苏氨酸的反馈抑制
HDⅡ:受蛋氨酸的阻遏
④苏氨酸脱氨酶(异亮氨酸合成途径的第一个酶)
受异亮氨酸的反馈抑制和阻遏
; 菌种选育手段一:切断支路代谢(营养缺陷型的选育)
通过诱变使高丝氨酸脱氢酶缺失,切断通向苏氨酸、蛋氨酸的代谢流,控制高丝氨酸(或苏氨酸+蛋氨酸)量,过量积累赖氨酸。 ; 菌种选育手段二:抗结构类似物突变株的选育
通过诱变使天冬氨酸激酶编码的结构基因发生突变,对赖氨酸及结构类似物不敏感,即使有过量赖氨酸存在,该酶也不与赖氨酸或结构类似物结合,但酶活性中心不变。
优点:突变株遗传性地解除了终产物对自身合成途径的酶的调节控制,不受培养基中所要求物质浓度的影响,生产较稳定。
; 2.黄色短杆菌、谷氨酸棒杆菌中的调节机制;①天冬氨酸激酶( AK)
受苏氨酸和赖氨酸的协同反馈抑制
②丝氨酸脱氢酶(HD)(通向苏氨酸、蛋氨酸分支的第一个酶)
受苏氨酸的反馈抑制
蛋氨酸的阻遏
③苏氨酸脱氨酶(异亮氨酸合成途径的第一个酶)
受异亮氨酸的反馈抑制
; 菌种选育手段一:切断支路代谢(营养缺陷型的选育)
在分支途径中,如果减少某一末端产物的浓度,常常可以积累另一末端产物。
通过诱变使高丝氨酸脱氢酶缺失,切断通向苏氨酸、蛋氨酸的代谢流,控制高丝氨酸(或???氨酸+蛋氨酸)量,过量积累赖氨酸。 ;菌种选育手段二:渗漏缺陷型
渗漏缺陷型—是一种特殊的营养缺陷型,是遗传性代谢障碍不完全的突变型。其特点是酶活力下降而不完全丧失,并能在基本培养基上少量生长。
; 菌种选育手段三:抗结构类似物突变株的选育
通过诱变使天冬氨酸激酶编码的结构基因发生突变,对赖氨酸及结构类似物不敏感,即使有过量赖氨酸存在,该酶也不与赖氨酸或结构类似物结合,但酶活性中心不变。
优点:突变株遗传性地解除了终产物对自身合成途径的酶的调节控制,不受培养基中所要求物质浓度的影响,生产较稳定。
;19
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