理化生基因工程基本操作程序.pptx

一、目的基因的获取;;;编码区;外显子：真核细胞基因DNA中的编码序列，这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质。 内含子 ：真核细胞基因 DNA中的间插序列，这些序列被转录成RNA，但随即被剪除而不翻译。 ;2.目的基因的概念;3.目的基因的获取的方法;（1）从基因库中获取目的基因;;部分基因文库的建立方法;cDNA合成过程 ;②基因组文库和cDNA文库的主要区别;（2）应用PCR技术扩增目的基因;;怎样从基因文库中找到我们所需要的目的基因;以哺乳动物基因组DNA为例，介绍Southern印迹杂交的基本步骤 ;以哺乳动物基因组DNA为例，介绍Southern印迹杂交的基本步骤;以哺乳动物基因组DNA为例，介绍Southern印迹杂交的基本步骤;(3)用化学方法直接人工合成目的基因;1.作用：;质粒;寻根问底：;资 料:;三、将目的基因导入受体细胞;①特点: ;Hin d限制性酶ⅠⅡ;花粉管通道法：;基因枪法：;;③常用法：;例：; 若通过基因过程生产人的糖蛋白可以用大肠杆菌作为工程菌吗？;四 目的基因的检测与鉴定——检查是否成功;1.检测; ;变性;;例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。; 不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。;细菌的检测，将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。;1、有关基因工程的叙述中，错误的是( ) A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、人工合成目的基因不用限制性内切酶;2、下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥;3、有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为???载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;4、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 1 A 2D 3 D 4 C;;脱分化;;存活的大肠杆菌;Hin d限制性酶ⅠⅡ;;;;以哺乳动物基因组DNA为例，介绍Southern印迹杂交的基本步骤;质粒;资 料:; ;3、有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;;