神经细胞体外培养方法及应用.pptxVIP

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2021-06-28 发布于上海
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神经细胞体外培养方法及应用.pptx

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神经细胞体外培养方法及应用;神经细胞体外培养的历史;;神经组织的植块培养法;优点;不足;神经元的分离细胞培养方法;神经元的体外培养液;①葡萄糖为神经元能量代谢主要来源 33mm ②CO2 NaHCO3缓冲系统重要 HEPESO2耗量更高 ③K+ 神经元生理活动的重要离子，K+是神经元存活所必需的，K+ 24.5mM 能提高神经元存活，促分化 ④非神经元成分的抑制有 2-3天; 神经元无血清限定培养液 ;选择添加剂的基本过程;Bottenstein实验室经过长期研究发现如下添加剂比较好 ;N1的配方为;神经体外培养的生长基质 ;神??细胞培养操作程序表;370C，30min ? 舍弃胰蛋白酶，加入5ml培养液和10滴Dnase液 ? 用巴斯德吸管吹打20次，再用套有微量加样器头的加样器吹打20次 ? 若有组织残渣，将上清移至新试管再加3ml培养液反复吹打 ? 将细胞悬液收集于离心管，离心1200r/min ，8min，舍去上清，向沉淀加培养液，离心1200r/min，8min ? ;加入培养液调整悬液中的细胞浓度，神经节细胞为1×107 ? 种入涂有poly-D-lysine的盖片上，每片50μl ? 放入CO2孵箱中过夜 ? 次日加3ml培养液 ? 2天后（培养的第三天）换入有DNA合成阴断剂的培养液 ;神经元的分离培养过程;大鼠海马神经细胞培养方法 ;神经元的体外存活时间;体外分化标志;神经细胞的特殊染色鉴定方法;神经细胞培养的应用;实验方法;研究手段及测量指标;培养神经细胞的观察和鉴定;;研究范围;放映完毕;神经元的体外培养液;Bottenstein实验室经过长期研究发现如下添加剂比较好 ;神经细胞培养操作程序表;加入培养液调整悬液中的细胞浓度，神经节细胞为1×107 ? 种入涂有poly-D-lysine的盖片上，每片50μl ? 放入CO2孵箱中过夜 ? 次日加3ml培养液 ? 2天后（培养的第三天）换入有DNA合成阴断剂的培养液 ;大鼠海马神经细胞培养方法 ;