血红蛋白的提取和分离上课用介绍.pptxVIP

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2021-07-03 发布于上海
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血红蛋白的提取和分离上课用介绍.pptx

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本课题学习目标;1.分离生物大分子的基本思路：;基础知识（一）凝胶色谱法（分配色谱法）;分子量;4.具体过程;凝胶色谱法分离蛋白质过程的动画演示;用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质 A．路程较长，移动速度较慢 B．路程较长，移动速度较快 C．路程较短，移动速度较慢 D．路程较短，移动速度较快; （二）缓冲溶液;3.缓冲溶液的配制:; （三）电泳：;;样品处理;血液;血红蛋白; 二、实验操作;初次离心后的结果;3次洗涤后的结果;2、血红蛋白的释放;磁力搅拌器;3、分离血红蛋白溶液;甲苯层（无色透明）;4、透析;透析过程动画演示;利用透析袋透析;纯化－－凝胶色谱操作;凝胶色谱操作:;2、凝胶色谱柱的装填;装配好的凝胶柱; ;3、样品加入与洗脱;3.样品的加入和洗脱;（3）样品加入与洗脱;收集得到的纯化后的蛋白;注意事项;思考下面的问题：; 观察你处理的血液样品离心后是否分层（见教科书图5-18），如果分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。; 如果凝胶色谱柱装填得很成功、分离操作也正确的话，能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离的效果不好，这与凝胶色谱柱的装填有关。;;基础知识（一）凝胶色谱法（分配色谱法）; （二）缓冲溶液; 二、实验操作;2、血红蛋白的释放;纯化－－凝胶色谱操作;