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三黄软膏治疗急性软组织损伤论文
三黄软膏是浙江省中医院的医院制剂散瘀膏,在临床应用30余年,治疗急性软组织损伤患者达数万人,疗效显著[1]。本实验通过提取散瘀膏药物的有效成分,从损伤证候评估、损伤局部组织前列腺素E2(PGE2)的含量的测定来阐明其对急性软组织损伤的疗效,现将实验结果报告如下。
1材料与方法
1.1实验动物健康SD大鼠180±10g36只,雌雄各半,浙江医学科学院实验动物中心提供。饲养期间给予啮齿类动物标准颗粒饲料及自由饮水。
1.2药品及试剂①三黄软膏由浙江中医药大学药学院提供;②青鹏膏:西藏林芝奇正藏药厂,批号:0703060239;③RatPGE2ELISAKit:美国Cayman公司。批号:180174。
1.3实验动物造模及分组将实验组30只SD大白鼠在实验前一天用8%硫化钠溶液双腿去毛。实验前一天禁食禁水。用3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(注射剂量:1.5ml/kg),麻醉成功后将大鼠固定在自制打击器上,将200g重的砝码通过与砝码直径相当的塑料管中自20cm高处垂直自由落在大鼠小腿后侧,踝关节上2.5cm处,连续打击2次,打击面积约1×2cm2,30min后可见打击局部出现散在出血点,皮下瘀肿创面,但皮肤完整无破损且无骨折的急性软组织损伤动物模型。将造模成功的大鼠半小时后按随机数字表法分为模型对照组(B)6只,给予布胶外敷;基质对照组(C)6只,给予基质1.6g/kg,后用布胶固定;青鹏膏对照组(D)6只,给予青鹏膏1.6g/kg,后用布胶固定;三黄软膏低剂量组(E)6只,给予三黄软膏1.6g/kg,后用布胶固定;三黄软膏高剂量(F)组各6只,给予三黄软膏3.2g/kg,后用布胶固定。换药1次/d。正常组(A):给予正常饲养。
1.4损伤证候评估参考冯芳军等[2]损伤证候指数,观察伤肢肿胀和瘀斑等证候表现,并评分。①皮下瘀血:多量块状计2分,少量点状计1分,无瘀血者计0分。②下肢肿胀:明显肿胀计2分,稍有肿胀计1分,无肿胀者计0分。③皮肤颜色:紫暗色深计2分,暗红色浅计1分,色泽正常计0分。计算总积分。每天观察记录1次。总积分=(左腿积分+右腿积分)/2。
1.5前列腺素E2(PGE2)含量的测定于造模后3d、5d分别于各组中任取3只大鼠处死,用手术刀切开大鼠受打击部位皮肤,分离皮下组织,切取受打击部位的中心(踝关节上2.5cm处)呈青紫色的肌肉组织,用生理盐水漂洗1min,滤纸吸干,分析天平称取100±5mg,每10mg组织加入生理盐水0.5ml,于匀浆器中缓慢而均匀地研磨15min,至匀浆液呈均匀一致悬浊液,倒入试管中,在高速冷冻离心机以2500r/min离心15min,收集上清液,置-20℃冰箱中备用。用ELISA法测定PGE2的含量。具体操作步骤按照试剂盒要求完成。
1.6统计方法所有数据以“平均数±标准差”(x±s)表示,多组计量资料采用单因素方差分析,两两比较用LSD检验。所有统计学处理在SPSS13.0统计软件上完成。
2结果
2.1损伤证候评估造模后第1天各组大鼠的损伤证候指数基本相同,组间比较无显著性差异(P0.05);治疗3d后,各组的损伤证候指数较造模1天后有所下降,同时D组、E组及F组的损伤证候指数明显小于同期的B组和C组(P0.05),B组和C组之间损伤证候指数基本相同,无显著性差异(P0.05);治疗5d后各组的损伤证候指数较治疗3d后有所下降,与同期的B组和C组相比,D组、E组和F组的损伤证候指数有明显下降,显著性差异明显(P0.05),B组和C组之间损伤证候指数基本相同,无显著性差异(P0.05)。各组损伤指数见表1。
表1各组急性软组织损伤治疗后不同时期的损伤证候指数(略)
2.2大鼠局部PGE2的含量治疗3d后,A组与B组、C组比较存在显著性差异(P0.05);B组、C组与D组、E组和F组比较存在显著性差异(P0.05)。
治疗5d后,A组与B组、C组比较无显著性差异(P0.05),而与D组、E组和F组比较存在显著性差异(P0.05);而D、E组和F组之间比较无显著性差异(P0.05)。见表2。
表2治疗3、5天后各组组织PGE2含量的改变(略)
3讨论
前列腺素E2(PGE2)是重要的炎性介质,具有多种生物活性,参与各种病理生理过程。前列腺素E2在体内分布广泛,它是具有重要生物学活性的前列腺素
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