第十六课维生素类药物分析(三).pptx

第十章 维生素类药物的分析（三）第四节 维生素D的分析维生素D2（骨化醇、麦角骨化醇）维生素D3（胆骨化醇）一、结构与性质1. 溶解性 脂溶性2. 不稳定性 含多个双健易被氧化， 对酸不稳定3. 旋光性 性状项下比旋度4. 显色反应5. 紫外吸收特征 性状项下吸收系数二、鉴别试验（一）显色反应1. 与醋酐-浓硫酸反应Ch.P（2005）维生素D2 Ch.P（2005）【鉴别】（1）取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml，振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后成绿色。维生素D3 Ch.P（2005）【鉴别】（1）取本品约0.5mg，加三氯甲烷5ml溶解后，加醋酐0.3ml与硫酸0.1ml振摇，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色、蓝绿色，最后变为绿色。2. 与三氯化锑反应BP维生素D + 三氯化锑 →橙红色→粉红色3. 其他显色反应（二）IR Ch.P（2005）维生素D2 Ch.P（2005）【鉴别】（2）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集452图）一致。（三）维生素D2、D3的区别反应 维生素D 与乙醇+硫酸反应维生素 D2显红色，?max在570nm维生素 D3显黄色，?max在495nm三、杂质检查维生素D2中麦角甾醇的检查灵敏度法维生素D2 Ch.P（2005）【检查】麦角甾醇 取本品10mg，加90%乙醇2ml溶解后，加洋地黄皂苷溶液（取洋地黄皂苷20mg，加90%乙醇2ml，加热溶解制成）2ml，混合，放置18小时，不得发生浑浊或沉淀。四、含量测定HPLC药典附录维生素D测定法 共有三法第一法适用于无维生素A醇及其它杂质干扰时 正相色谱、内标法1. 色谱条件 色谱柱 硅胶 流动相 正己烷 –正戊醇（997:3） 内 标 邻苯二甲酸二甲酯维生素D3前维生素D3维生素D3对照品光照△反式维生素D3速甾醇D32. 系统适应性试验目的 获得待测成分及各种干扰成分色谱峰， 检查分离度是否符合规定3. 计算校正因子（对照品为维生素D3）（1）维生素D校正因子（f1）（2）前维生素D折算成维生素D的校正因子（f2）4. 计算含量维生素D及前维生素D折算成维生素D的总量（mi）单位 = 0.025 μg 按第一法第二法适用于有维生素A醇及其它杂 质干扰时第二法净化后样品维生素D第三法适用于按第二法处理后前维 生素D仍被干扰的样品外标法计算维生素D含量维生素D2 Ch.P（2005）【含量测定】 精密称取本品25mg，置100ml棕色量瓶中，加三甲基戊烷80ml，避免加热，用超声处理1分钟使溶解，加三甲基戊烷至刻度，摇匀；精密量取上述溶液与内标溶液各5ml，置50ml棕色量瓶中，加正己烷至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照维生素D测定法（附录Ⅶ K 第一法）测定，即得。 第五节 维生素E苯并－二氢吡喃醇相对活性名 称R1R2CH31.0α-生育酚CH3β-生育酚CH3H0.5γ-生育酚HCH30.2δ-生育酚HH0.1***生物效价 右旋体 ： 消旋体= 1.4 ：10（天然品）（合成品）dl－α－生育酚醋酸酯一、结构与性质△苯环 + 二氢吡喃环 + 饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键 易水解二、鉴别75℃15′硝酸反应（一）橙红色生育酚强氧化剂HNO3生育红（橙红色） 取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热15分钟，溶液应显橙红色。[O]△（二）三氯化铁－联吡啶反应[O]生育酚弱氧化剂对-生育醌红色（三）UV法 = 41.0～45.50.01%无水乙醇中λmax = 284nmλmin = 254nm维生素EUV图（四）TLC法薄层板 硅胶G展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）显色剂 硫酸（105℃ 5′） VitE Rf = 0.7三、特殊杂质1. 酸度 检查制备过程中引入的游离羧酸，酸碱滴定法2. 游离生育酚的检查 （一）原理 利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈（二）试剂硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄→灰紫）（M生育酚= 430.8）例 取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。（三）限量≤2.15％药典规定消耗硫酸铈液（0.01mol/L）≤1.0ml若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L，应重新计算硫酸铈的消耗量设：应消耗硫酸铈液≤ V ml 0.01×1.0 ＝实际浓度× V例 Ce(SO4)2 = 0.01020mol/L