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2021年生理学学生实验报告 2021年生理学学生实验报告 PAGE / NUMPAGES 2021年生理学学生实验报告 昆明理工大学医学院 生理学试验汇报 (供临床医学专业使用) 试验一 坐骨神经-腓肠肌标本制备 [1] 试验目 1.学习机能学试验基础组织分离技术; 2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本方法; 3.了解刺激种类。 [2] 试验原理　　 蛙类部分基础生命活动和生理功效与恒温动物相同, 若将蛙神经-肌肉标本放在任氏液中, 其兴奋性在多个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激, 可在神经和肌肉上产生一个动作电位, 肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次, 表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在机能学试验中常利用蛙坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、 肌肉兴奋、 兴奋性, 刺激与反应规律和肌肉收缩特征等, 制备坐骨神经腓肠肌标本是机能学试验一项基础操作技术。 [3] 试验对象 蛙 [4] 试验药品 任氏液 [5] 仪器与器械 一般剪刀、 手术剪、 眼科镊(或尖头无齿镊)、 金属探针(解剖针)、 玻璃分针、 蛙板(或玻璃板)、 蛙钉、 细线、 培养皿、 滴管、 电子刺激器。 [6] 试验方法与步骤 ① 破坏脑、 脊髓 取蛙一只, 用自来水冲洗洁净(勿用手搓)。左手握住蛙, 使其背部向上, 用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘枕骨大孔处垂直刺入椎管(图3-1-1)。然后将探针改向前刺入颅腔内, 左右搅动探针2～3次, 捣毁脑组织。假如探针在颅腔内, 应有碰及颅底骨感觉。 再将探针退回至枕骨大孔, 使针尖转向尾端, 捻动探针使其刺入椎管, 捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管感觉是, 进针时有一定阻力, 而且伴随进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全, 蛙下颌呼吸运动消失, 四肢完全松软, 失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动, 退出椎管。如蛙仍有反射活动, 表示脑和脊髓破坏不根本, 应重新破坏。 图2-1-1 捣毁蟾蜍脊髓 ② 剪除躯干上部、 皮肤及内脏? 用左手捏住蛙脊柱, 右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、 腹肌、 脊柱一并剪断(图3-1-2), 然后左手握住蛙后肢, 紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去(注意避开坐骨神经), 并剪去肛门周围皮肤, 留下脊柱和后肢(图2-1-3)。 图2-1-2横断脊柱 图2-1-3 剪除躯干上部及内脏 ③ 剥皮? 一只手捏住脊柱断端(注意不要捏住脊柱两侧神经), 另一只手捏住其皮肤边缘, 向下剥去全部后肢皮肤(图2-1-4)。将标本放在洁净任氏液中。将手及使用过探针、 剪刀全部冲洗洁净。 图2-1-4 剥去皮肤 ④ 分离两腿? 用镊子取出标本, 左手捏住脊柱断端, 使标本后面朝上, 右手用粗剪刀剪去突出骶骨(也可不进行此步)。然后将脊柱腹侧向上, 左手两个手指捏住脊柱断端横突, 另一手指将两后肢担起, 形成一个平面。此时用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分为两半(注意勿伤坐骨神经)。将其中二分之一后肢标本置于盛有任氏液中备用, 另二分之一放在蛙板上进行下列操作。 ⑤ 辩认蛙后肢关键肌肉 蛙类坐骨神经是由第7、 8、 9对脊神经从相对应椎间孔穿出汇合而成, 行走于脊柱两侧, 到尾端(肛门处)绕过坐骨联合, 抵达后肢背侧, 行走于梨状肌下股二头肌和半膜肌之间坐骨神经沟内, 抵达膝关节腘窝处有分支进入腓肠肌。 ⑥ 游离坐骨神经和腓肠肌 用蛙钉或左手两个手指将标本绷直、 固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经, 然后在标本背侧于股二头肌与半膜肌肌肉缝内将坐骨神经与周围结缔组织分离直到腘窝, 但不要伤及神经, 其分支待以后用手术剪剪断。一样用玻璃分针将腓肠肌与其下结缔组织分离并在其跟腱处穿线、 结扎。 ⑦ 剪去其它不用组织, 操作应从脊柱向小腿方向进行。 (a) 剪去多出脊柱和肌肉?? 将后肢标本腹面向上, 将坐骨神经连同2～3节脊椎用粗剪刀从脊柱上剪下来。再将标本后面向上, 用镊子轻轻提起脊椎, 自上而下剪去支配腓肠肌以外神经分支, 直至腘窝(图3-1-5A), 并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围肌肉, 并将股骨刮净, 用粗剪刀剪去股骨上端1/3(保留2/3), 制成坐骨神经-小腿标本。 (b) 完成坐骨神经腓肠肌标本? 将脊椎和坐骨神经从腓肠肌上取下, 提起腓肠肌结扎线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节以下部位, 便制成了坐骨神经-腓肠肌标本(图3-1-5B)。 ⑧ 检验标本? 用镊子夹持坐骨神经中枢端, 如腓肠肌发生快速而显著收缩, 说明标本兴奋性良好。标本浸入盛有任氏液培养皿中备用。 图2-