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.. 细胞因子生物学活性检测 细胞因子水平测定是细胞免疫功能检测的一个重要组成部分。由于许多细胞因子 cDNA 克隆和表达的成功， 给细胞因子单克隆抗体制备、 生物学功能的鉴定提供必要条件。 目前检 测细胞因子水平主要包括两类方法： 一是生物学活性的检测， 这类方法是利用细胞因子某一 特定的生物学作用所设计的检测方法，如 IL-2 维持活化 T 细胞的增殖， IFN 能保护病毒对 正常细胞的感染， TNF- α 选择性杀某些肿瘤细胞等，因此敏感性也较高；二是定量的检测， 常用酶联免疫吸附试验 (ELISA) ，如多克隆抗体与单克隆抗体，识别不同表位两种单克隆抗 体的双抗体夹心法，生物学和定量的检测方法各有优缺点，在必要时可同时进行检测。 一、 白细胞介素 1(IK-1) 生物学活性测定 白细胞介素 1 是一种重要的细胞因子，主要由单核 - 巨噬细胞产生， IL-1 不仅对多种免 疫活性细胞有重要的调节功能， 而且与发热、 炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。 目前 对 IL-1 产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。 ConA 刺激小鼠胸腺细胞检测 IL-1 生物学活性 ( 一 ) 原理 小鼠胸腺细胞在丝裂原刺激下表达 IL-1 受体，在有 IL-1 同时存在的条件下， IL-1 可 协同丝裂原促 T 细胞的增殖作用。根据加入 IL-1 后增殖水平 ( ３H-TdR 掺入率 ) 的增加可计 算出样品中 IL-1 的活性单位，或计算出刺激指数。 ( 二 ) 操作步骤 取 6～ 8 周龄 C57BL16小鼠，拉颈处死，无菌取胸腺 置不锈钢网筛上，用注射器针蕊研磨成细胞悬液 调整细胞数为 1.5 ×10 ７／ ml ↓ 细胞悬液内加入 ConA，使终浓度为 3 μg ／ml ，在 96 孔 培养板中加 100 μl(1.5 ×10 ６细胞 ) ↓ 加入不同稀释度待测样品和 IL-1 标准品 100 μl ／孔(ConA 终浓度为 1.5 μg ／ml) ↓ 37℃ CO ２孵箱 66h 每孔加３ H-TdR 0.5 μci 孵箱 6h 多头细胞收集仪收获于 9999 型玻璃纤维纸上 ↓ 烤干，移入液闪瓶中，加适量闪烁液，于液闪仪上测 β 计数 计算 : 1. 从 IL-1 标准曲线上测得 IL-1 的活性单位 资料 .. 2. 也可用刺激指数 (SI) 表示 实验组 cpm SI ＝────── ×100％ 对