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非梅毒螺旋体血清试验-TRUST [原理] VDRL-甲苯胺红+Ab(血清) 红色凝集物(肉眼观察) [方法] 定性 定量 血清 原血清 1:2 1:4 1:8… 50 50 50 50 抗原 1滴 1滴 1滴 1滴(16~18ul) 混匀,旋转式摇床(100转/分)转动8分钟,立 即观察结果。 2011.8.31 非梅毒螺旋体血清试验-TRUST [结果] 定性试验 阳性:出现由小至大的红色絮状物 (1+~4+)。 阴性:颗粒均匀、细小、不出现凝集。 定量试验 以出现阳性反应的最高稀释度作为最终滴度。 2011.8.31 TRUST凝集图像 2011.8.31 非梅毒螺旋体血清试验-TRUST [临床意义] 1.非特异性反应的初筛试验,可用作疗效观察、判愈、复发或再感染指征。 2.初筛试验阳性可表示: *现症感染患者 *接受治疗近期患者 *生物学假阳性者 2011.8.31 非梅毒螺旋体血清试验-TRUST [注意事项] 1.试剂保存2~8℃ ,不能0℃以下冰冻。 2.实验环境以23~29 ℃为宜,用前试剂恢复室 温。 3.试剂在效期内使用,怀疑试剂失效,需用试 剂阴、阳对照及已知阴、阳标本对照。 4.用旋转式摇床,不能用平衡式振荡仪。 5.试验要用纯血清,以防假阴性。 6.血清加抗原后要充分混匀分开。 2011.8.31 非梅毒螺旋体血清试验-TRUST 7.试验完毕立即观察结果,否则影响结果准确性。 8.定性阳性者,确诊治疗前应作定量试验,一是可以了解患者抗体滴度,便于复查作比较,以判断疗效和预后观察;二可以避免“前带现象”。 9.初筛试验阳性,应做确证试验以排除生物学假阳性。 10.AIDS合并感染梅毒,梅毒血清可阴性,应作暗视野检查螺旋体,同时做HIV检查。 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 一、TPPA(梅毒螺旋体明胶凝集试验) [原理] TP-Ag(明胶颗粒)+Ab(血清) 洋红 色凝集(肉眼观察) 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [方法] 定性、定量试验 孔号 1 2 3 4 5 6 7 8 … 血清稀释液 100 25 25 25 25 25 25 25 … 血清标本 25 25 25 25 25 25 25 25 25 标本稀释度 1:5 1:10 1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 非致敏颗粒 25 致敏颗粒 25 25 25 25 25 最终滴度 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 轻轻振荡混匀,置湿盒内室温(15~30 ℃ )2小时后观察结果。 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [结果] 定性试验 2+~4+:颗粒凝集覆盖整个孔底,边缘粗糙 呈膜状。 1+:颗粒凝集呈多边性粗糙大环状。 +/-:颗粒浓集于孔底呈小环状 -:颗粒聚集于孔中央,边缘光滑呈小红点。 定量试验 出现阳性反应的最高稀释度作为最终滴度 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [临床意义] 1. 确证试验阳性可诊断梅毒感染,一种是现症感染者,另一种是治愈者。 2.由于特异性梅毒螺旋体抗体可终生阳性,因此不能用来作为疗效观察及治愈的判断标准。一般只作定性试验,根据临床需要才做定量试验。 2011.8.31 梅毒螺旋体血清试验-TPPA [注意事项] 1.反应板要清洁干净,遐免假阳性。 2.要用U形板不能用V形板,遐免假阴性。 3.试剂保存2~8℃ ,不能0℃以下冰冻。 4.反应温度以18~30
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