克隆形成实验.docVIP

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PAGE PAGE 1 克隆形成实验 细胞生长状况有关指标的检测方法 一、细胞计数 这是细胞培养中常用的基本技术之一。所用材料为血球计数板,巴氏吸管和显微镜。 细胞计数的基本步骤: (1)取清洁计数板和专用盖玻片,用丝绸布轻轻拭干. (2)取细胞悬液0.3mL,加入0.9mL结晶紫(或台盼至)染液,混匀后滴半滴于血球计数板内,以充满不外溢为宜。也可直接将细胞悬液在一侧滴加到盖玻片中,不要溢出,也不要过少或出现气泡. (3)在显微镜下用10×物镜观察计数四角大分格中的细胞数。代入下式得出细胞密度。 ?? 细胞数/ml=(4大格细胞数之和/4)×104×稀释倍数 台盼蓝染色法可计算出活细

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