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China Biotechnology ，2014 ，34 (7)38-43
中国生物工程杂志 :
DOI :10． 13523 /j． cb．
免疫磁珠纯化小鼠精原干细胞的研究*
1 1 1 1 1 1 2 ＊ 1 ＊
贺亚南 陈晓丽 任晓霞 郝海生 秦 彤 赵学明 路永强 ＊ 王 栋 ＊
(1 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与利用重点开放实验室 北京 100193)
(2 北京畜牧兽医总站 北京 10017)
摘要 精原干细胞( spermatogonial stem cells ，SSCs) 富集纯化是利 用 SSCs 进行基因修饰新方法等
。 ， CD90． 2 SSCs ，
研究的前提基础 采用免疫磁珠分选法 使 用干细胞抗体 进行小鼠 的纯化富集 并
采用流式细胞分析 法和 定量 PCＲ 验证了磁珠 分选效 率 。流 式细胞分析 结果: 免疫磁珠 分选后
SSCs 50． 11% 。 PCＲ : GATA4
纯度为 荧光定量 检测 结果 磁珠 分选后 支持细胞特异表达基因 显著
( 6 ) 、SSCs GFＲ -1 ( 6． 5 ) 、 OCT4 ( 5． 9
下调 倍 表达基因 α 上调 倍 生殖干 细胞特 异表达基因 极 显著上 调
) ，3 ， 6 。
倍 个基 因相对表达量的变化说 明 免疫磁珠分选效率为 倍 流式细胞分析法所产生的偏差可能是
受到了未解 离磁珠及 SSCs 本身转基因 荧光的影响 。
关键词 免疫磁珠分选 流式细胞分析 荧光定量 PCＲ
中图分类号 Q819
SSCs 体 、 。 ，
外遗传修饰为开发高效 简便的转基因动 率 基于细胞形态特点的形态学分离法虽然经济 但
， ， ，
物制作方法开辟了新途径 也为濒危遗传资源保护开 是操作繁琐 一旦错过最佳的操作时机 过度生长的
。 (sertoli cells ，SCs) SCs SSCs ［7］。 、
辟了新途径 关于睾丸支持细胞 和 会使 迅速消亡 而层粘连蛋白分选 流式
SSCs 相互作用的研究表明，SCs 分泌的胶质细胞源性 细胞分选法(fluorescence-activated cell sorting ，FACS )、
神经营养因子(glial cell Line-derived neurotrophic factor ， 免疫磁珠分选法(magnetic-activated cell sor
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