绣球菌低分子量葡聚糖的分离及活性分析.pdfVIP

浙江理工大学硕士学位论文 绣球菌低分子量葡栗糖的分离及吊性分析 摘要 目前，多糖类药物己在临床广泛使用，其研发也备受关注，但多糖活性检测的方法 尚主要采用动物实验及原代细胞培养。由于动物实验工作量大、成本高，原代细胞不稳 定等因素，造成检测工作复杂、检测结果不稳定，均无法实现有效的高通量筛选。本研 究利用人单核白血病升IP-l 细胞株在葡聚糖剌激下可分泌细胞因子的特点，建立了细胞 水平上葡聚糖生物活性的检测方法zπ-IP-l 细胞加入不同浓度的葡聚糖. 48 h 后离心收 集上清. ELISA 法检测 IFN-α、 IFN-y、1NF-α、 IL1 2 四种细胞因子表达水平。研究结果 表明， η-IP-l 细胞在不同葡聚糖刺激下，分泌1NF-α 的能力极低. ELISA 法无法检测培 养液中的含量 IFN-y 和 IL12 表达量虽有提高，但不够显著:只有 IFN-α 含量有极显著 变化，故细胞培养液中 IFN-α 含量可作为评价葡聚糖活性的标准，建立了一种有效的、 高通量筛远活性多糖的技术方法。 绣球菌是一种高葡聚糖含量的珍贵药食两用菌，绣球菌葡聚糖具有抗肿瘤、抗病毒、 增强免疫力等多种