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第五章?发酵过程控制第一节 发酵过程的主要控制参数第二节 发酵过程的代谢变化第三节 基质的影响及其控制第四节 温度的影响与控制第五节 pH的影响与控制第六节 溶氧浓度的变化和控制 第七节 补料的作用及其控制第八节 泡沫的影响与控制第九节 发酵终点判断发酵过程原理一、发酵的基本概念1、微生物发酵 利用微生物体来制得产物的需氧或厌氧的任何过程。2、初级代谢产物 关系到微生物新陈代谢过程中的能量代谢、细胞生长和细胞结构的代谢产物。3、次级代谢产物 微生物菌体在生长期不能合成的、一般在菌体生长静止期中合成的与菌体成长繁殖无明显关系的产物。 抗生素产生菌在一定条件下吸取营养物质,合成其自身菌体细胞,同时产生抗生素和其它代谢产物的过程,称为抗生素发酵。发酵过程是由各种酶系统的作用而发生的一系列生化反应,抗生素是这个过程的次级代谢产物。发酵方法微生物发酵有三种方式: 分批发酵(batch fermentation) 补料分批发酵(fed-batch fermentation) 连续发酵(continuous fermentation) 工业上防止出现菌种衰退和杂菌污染等实际问题,大都采用分批发酵或补料分批发酵这两种方式。1、分批式发酵 ①理论基础 把培养液一次性装入发酵罐,灭菌后接入一定量的种子液,在最佳条件下进行发酵培养。 是产生菌体经过一定时间不同级数的种子培养,达到一定菌体量后,移种到发酵罐进行纯种和通气搅拌培养,到规定时间即行结束的过程。 ②优缺点: 发酵周期短,产品质量易控制,不易发生杂菌污染,对原料组成要求较粗放。 发酵体系中开始时基质浓度很高,到中后期营养物质浓度很低,这对发酵反应不利。 2、补料分批发酵①理论基础 在分批式操作的基础上,开始时投入一定量的基础培养基,到发酵过程适当时期,开始连续补加碳源或氮源或其他必需物质,但不取出培养液,直到发酵终点,产率达最大化,停止补料,最后将发酵液一次全部放出。。②优缺点: 优点:在发酵过程中慢慢地加入培养基,使其在发酵液中保持适宜水平,同时又稀释了生成的产物浓度,避免了高浓度产物和底物的抑制作用,也防止了后期养分不足而限制菌体生长。 缺点:受发酵罐操作容积的限制 3、连续式发酵 ①理论基础 菌体与培养液一起装入发酵罐,在菌体培养过程中不断补充新培养基,同时取出包括培养液和菌体在内的发酵液,发酵体积和菌体浓度等不变,使菌体处于恒定状态的发酵条件,促进菌体的生长和产物的积累。②优缺点:连续培养优点:能维持基质浓度,可以提高设备的利用率和单位时间的产量,节省发酵罐的非生产时间,便于自动控制。但由于培养时间长,难以保证纯种培养。并且菌种变异可能性较大,故在工业规模上很少采用。发酵过程控制微生物发酵的生产水平取决于:1)生产菌种本身的特性;2)合适的环境条件,使它的生产能力充分表达出来。这些环境条件包括培养基、培养温度、pH、氧的需求等。为了掌握菌种在代谢过程中的代谢变化规律,需要监测一些参数,这些参数包括菌体浓度、糖、N消耗及产物浓度,培养温度、pH、溶氧等。第一节 发酵过程的主要控制参数(一)物理参数(二)化学参数(三)生物参数一、发酵过程的主要控制参数(一)物理参数1.温度(℃) 发酵整个过程或不同阶段中所维持的温度。酶反应速率、氧在培养液中的溶解度与传递速率、菌体生长速率和产物合成速率2.压力(Pa)发酵过程中发酵罐维持的压力,一般维持在0.2×105~0.5×105Pa。保证纯种的培养,间接影响菌体代谢。3.搅拌转速(r/min)搅拌转速是指搅拌器在发酵过程中的转动速度,通常以每1min的转数来表示。它的大小与氧在发酵液中的传递速率与发酵液的均匀性有关。4.搅拌功率(kw)指搅拌器搅拌时所消耗的功率,常指每1m3发酵液所消耗的功率(kw/m3)。它的大小与氧容量传递系数有关。5.空气流量[V/(V·min),简称VVM]每1min内每单位体积发酵液通入空气的体积,也是需氧发酵的控制参数。与氧的传递和其他控制参数有关。一般控制在0.5~1.0V/(V·min)范围内。6.粘度(Pa·s) 粘度大小可以作为细胞生长或细胞形态的一项标志,也能反映发酵罐中菌丝分裂过程的情况。通常用表观粘度表示之:它的大小可改变氧传递的阻力,又可表示相对菌体浓度。7.浊度(%) 浊度是能及时反映单细胞生长状况的参数,对某些产品的生产是极其重要的参数。8. 料液流量(L/min) 这是控制流体进料的参数。(二)化学参数1. pH(酸碱度)发酵液的pH是发酵过程中各种产酸和产碱的生化反应的综合结果。它是发酵工艺控制的重要参数之一。它的高低与菌体生长和产物合成有着重要的关系。2.基质浓度(g或mg%) 这是发酵液中糖、氮、磷等重要营养物质的浓度。它们的变化对产生菌的生长和产物的合成有着重要的影响,也是提高代谢
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