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审 核 人
标题 血液中乙醇的检测作业指导书 批 准 人
实施日期
1.目的
检测血液中乙醇含量。
2. 适用范围
本标准适用于血液中乙醇的定性、定量分析。
3. 职责
技术负责人批准考核合格的毒物分析专业人员完成此项工作。
4. 试剂与对照品
4.1 乙醇(色谱纯 99% ,Sigma )
4.2 乙醇溶液:精密称取乙醇 1.0097g 于 100ml 容量瓶内,添加蒸馏水至刻度,
混匀,得 10.00mg/ml 乙醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至 20 倍,得 0.50mg/ml
乙醇控制液,放置样品室 4 ℃冰箱保存,有效期为 6 个月。
4.3 叔丁醇(色谱纯 99% ,Chem Service )
4.4 内标叔丁醇溶液:精密称取叔丁醇 0.5026g 于 100ml 容量瓶内,添加蒸馏
水至刻度,混匀,得 5.00mg/ml 叔丁醇储备液,将储备液用蒸馏水稀释至 125
倍,得 40ug/ml 叔丁醇内标工作液, 放置样品室 4 ℃冰箱保存, 有效期为 6 个月。
4.5 乙醇标准溶液( Gerilliant )
乙醇标准溶液: 10mg/dl ,20mg/dl ,50mg/dl ,80mg/dl ,100mg/dl ,200mg/dl ,
300mg/dl
5. 血液中乙醇定性、定量的分析
5.1 样品处理
用精密移液器取样品血 0.10 mL 及 0.50 mL 叔丁醇 40 μg/mL 内标工作液 2
份,各加入样品瓶内,盖上硅橡胶垫,用密封钳加封铝帽,混匀,置于顶空自动
进样器中加热 10 min ,待测。
5.2 气相色谱仪条件
色谱柱: DB-ALC1 毛细管柱( 30m 0.32mm 1.2 m)
柱温:恒温 40 C
检测器:火焰离子化检测器( FID )
检测器温度: 250 C
进样口温度: 150 C
5.3 顶空自动进样分析条件
DANI 顶空自动进样器 ( 配 1mL 定量进样环 ) 工作条件:加热箱温度( Oven )
65 ℃,定量环温度 105 ℃,传输线温度( TR.Line )110℃,样品瓶加热平衡时间
(Vial EQ.Time ) 10.0min ,样品瓶加压时间( Pressuriz Time )0.10min ,定量
环充满时间( Loop Fill Time )0.10min ,定量环平衡时间 0.05min ,进样时间
(Inject Time )1.00min 。
5.4 记录
记录检材中色谱峰乙醇及内标物的峰面积值, 填入表中, 并根据工作曲线定
量计算方程计算出样品血中乙醇的浓度。
5.5 定量结果评价
样品应同时平行测定两份, 单柱单检测器两份样品测定结果的双样相对相差
(双柱双检测器两份样品测定结果的相对偏差)若不超过 5 %时(有凝血块的血
样不超过 10 %),结果按两份样品结果的平均值计算,双样相对相差若超过
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