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重组DNA分子的模型构建 第一页，共13页。 选修三 专题1基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 重组DNA分子的模型构建 第二页，共13页。 绿色卡片：质粒DNA的序列 材料用具 红色卡片：含有目的基因的DNA序列 剪刀：限制酶 胶带：DNA连接酶 第三页，共13页。 方法步骤 第一步：观察方框内序列的特点 第四页，共13页。 方法步骤 第二步：将虚线框内两侧的G-A之间作切口进行 “切割” ，接着沿中间线将两条单链剪开。 思考：G-A之间切口代表的是哪种化学键的断裂？ 两条链中间剪开，代表哪个过程？ 第五页，共13页。 DNA分子 G-A之间的切口 限制酶切割DNA分子两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键 第六页，共13页。 方法步骤 第三步：将红色卡片和绿色卡片上的切割位点按照碱基互补配对原则进行配对，并在G-A处进行黏结。 思考：G-A处的胶带代表了什么？ 第七页，共13页。 成功重组的质粒 第八页，共13页。 错误的重组---DNA的自身环化 质粒的自身环化 目的基因自身环化 第九页，共13页。 DNA重组过程 第一步：用一定的 切割质粒，使其出现一 个切口，露出 。 第二步：用 切割 目的基因，使其产生 。 第三步：将切下的目的基因 片段插入质粒的 处， 再加入适量 ， 形成一个重组DNA分子（重组质粒）。 限制酶 黏性末端 同一种限制酶 相同的黏性末端 切口 DNA连接酶 第十页，共13页。