液相色谱质谱联用仪校准作业指导书.docVIP

PAGE / NUMPAGES 液相色谱 - 质谱联用仪校准作业指导书 范围 本作业指导书合用于新安装、使用中和维修后的离子阱和四极杆（包含三重四级）两种 种类 LC-MS的校准，四极杆—飞翔时间串连等其余种类台式 LC-MS的校准可参照此作业指导 书进行。 引用文件 以下文件所包含的条则， 经过在本指导书中的引用而构成本指导书的条则。 本指导书公布时，所示版本均为有效。全部标准、规范或规程都会被订正，使用本指导书的各方应商讨使用以下文件最新版本的可能性。 JJF1001-1998《通用计量术语及定义》 JJF1059-1999《丈量不确立度评定与表示》 JJF1164-2006《台式气相色谱 - 质谱联用仪校准规范》 概括 液相色谱－质谱联用仪是以液相色谱为进样分别系统并经过必定的接口与质谱仪耦合 到仪器的剖析仪器。 样品经过色谱分别后经离子源离子化产生带有必定电荷、 质量数的离子，采纳不一样的质量剖析器把电离子按质荷比（ m/z）分开 , 获得依质量次序摆列的质谱图。经过对证谱图的剖析办理，进行定性、定量剖析。液相色谱－质谱联用仪主要由液相色谱、离子源、质量剖析器、检测器、真空系统和计算机等几部分构成。 计量特征 LC-MS各项技术指标见表 1 表 1 LC-MS 主要技术指标 技术指标 要 求 质量范围  不低于  1000 u 质量正确性  *  ±  0.6 u 分辨力（  R）*  ≤1 u 正 ESI  10 pg  利血平，  m/z609  处  S/N≥ 10： 1  （峰峰值） 信噪比  *  负 ESI  20 pg  氯霉素，  m/z321  处  S/N≥ 10： 1  （峰峰值） 正 APCI  20 pg  利血平，  m/z609  处  S/N≥ 10： 1  （峰峰值） 整机定量重复性  *  RSD≤ 10% 注： 1 标 * 的为一定校准项目 本技术指标仅供参照 , 不作为合格性判断依照 校准 / 测试条件 5.1 实验室环境要求 仪器室内不得有激烈的机械振动和电磁扰乱，不得寄存与实验没关的易燃、易爆和强 腐化性气体或试剂。 实验室温度： 20℃～ 30℃。 相对湿度：≤ 70％。 5.2 标准物质与试剂 利血平 -50%乙腈水溶液： 100.0 pg/ μL； 利血平 -50%乙腈水溶液： 10.0 pg/ μL； 氯霉素 -50%乙腈水溶液： 200.0 pg/ μL； 氯霉素 -50%乙腈水溶液： 20.0 pg/ μL； 碘化铯钠 - 异丙醇水溶液： 2 μg/ μ L 碘化钠， 50 ng/ μL 碘化铯溶于 50%异丙醇水溶 液； 5.3 标准设施 微量注射器： 10 μL 6 校准 / 测试项目与校准 / 测试方法 6.1 外观检查 仪器应拥有以下表记：名称、型号、制造厂名 ( 或企业名 ) 、出厂编号，并附使用说明 书。 仪器主机、色谱仪、计算机、真空零件和检测器等完满 ( 切合出厂说明书要求 ) ，各部 件连结正确，各插件密切配合，接触优秀，仪器启动后无异样噪声。 仪器的按键开关、各调理旋纽均能正常工作，无松动现象，指示灯显示正常。 仪器运转中使用的高电压、大电流和高温等应在仪器的明显部位贴有警告标记，提示 操作者注意这些潜伏危险。 仪器应注明使用电压和频次等。 6.2 分辨力 仪器稳固后，选择 ESI 正离子模式，采纳手动调谐，将碘化铯钠溶液 直接注入质谱中， 参照附录 D均匀选择 5 个扫描质量，优化仪器至最正确状态，记录各目标离子峰获得半峰宽 W1/2 。 6.3 质量范围 参照 6.2 条件将碘化铯钠溶液经过进样泵直接注入质谱中，选择 Scan 模式，设定扫描 范围为（ 20~2000）m/z，察看能否出现质量数 1000 以上的质谱峰。 6.4 质量正确度 参照 6.2 条件，将碘化铯钠溶液经过进样泵直接注入质谱中，记录 133， 323,473,623,922,1072 等碘化铯钠主要离子的质量数，理论值见附录 D，依据公式（ 1）计 算质量正确度 M M i 丈量 M i理论 (1) 式中 M i 丈量 —— 第 i 个离子三次丈量均匀值， u； M i理论 —— 第 i 个离子理论值， u。 6.5 信噪比 正 ESI 源 仪器稳固后，将 100pg/ul 的利血平溶液作为调谐液注入到质谱中，优化母离子最正确响应后记录参数并保留调谐文件。  609 至 调谐完成后依据调谐文件设定参数，以  50：50 乙腈水溶液为流动相，使用  C18 或等效色 谱柱分别，注入  10pg 利血平溶液，选择  SIM 模式，提取  m/ z  609特点离子，依