药学考研生化课件e.pdfVIP

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第五节 酶的分离、提纯及活性测定  一、 酶的分离和提纯  1. 选择材料 含有丰富的目标酶  胞外酶细胞内产生后分泌到细胞外发挥作用的酶 (含量高).  胞内酶在细胞内产生并且在细胞内发挥作用的酶.  2.酶的抽提  胞外酶 用水或缓冲液直接进行浸泡抽提  胞内酶 破碎细胞后再进行抽提  抽提液 一般用稀盐,稀酸或稀碱  温度 0-4℃  3.酶的纯化 要求尽量减少酶活力的损失  纯化过程的评价★  (1)纯化倍数=纯化后的比活力/纯化前的比活力  比活力(纯度)=活力单位数/mg蛋白  即每mg蛋白所含的酶

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