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油脂中的苯并a芘测定 正己烷 油脂中的苯并a芘测定lpar;正己烷rpar; 油脂中苯并（a）芘的高效液相色谱法检测 本方法参考GBT 22509-2021国标方法：动植物油脂 苯并（a）芘的测定 反相高效液相色谱法。 相关技术差异为： ①对仪器设备作了改动； ②氧化铝层析柱采用商品化Cleanert BaP固相萃取柱； ③将洗脱溶剂改为采用色谱纯的正己烷； ④待测液定容体积改为300μL，采用仪器自动进样，进样量为20μL； ⑤采用外标法定量计算。 用正己烷溶解油脂样品，上样到CleanertBaP固相萃取柱，去除脂肪酸等，再用正己烷洗脱苯并（a）芘，采用反相高效液相色谱法分离，荧光检测器检测。 二、试剂与材料 2.1CleanertBaP固相萃取柱，22g/60mL（P/N: BaP2260）：100-200目，brockmann活度Ⅳ级，在室温下避光保存，天津博纳艾杰尔科技有限公司； Venusil ASB-C18，250mm×4.6mm×5.0μm（P/N：VS952505-0） 2.2色谱纯正己烷； 2.3 苯并（a）芘标准储备液：称取10mg标准品于10mL容量瓶中，用正己烷定容，配制的标准储备液浓度为1000mg/L； 3.4 标准工作液：用正己烷稀释标准储备液，稀释的浓度为10μg/L。 三、仪器和设备 3.1 旋转蒸发仪，大于150mL的鸡心瓶或圆底旋蒸瓶； 3.2 氮吹仪； 3.3 涡旋混合器； 3.4 2ml进样瓶； Add: 6th Floor, Incubator Centre, No.12 Taihua Road, 5th Street, TEDA,Tianjin 300457, China. Tel: +86227023*203 Fax: +8622 地址：中国天津开发区第5大街泰华路12号创业中心6层，300457 3.5 250μL进样瓶玻璃内插管； 3.6 高效液相色谱仪，配自动进样器，荧光检测器。 四、样品前处理 4.1称取约0.300g的油样，用5mL正己烷溶解涡旋混合器上充分混匀。 4.2活化：用约30mL正己烷将氧化铝柱预先活化，活化过程直到氧化铝柱末端正己烷自然滴下约5mL为止。 在正己烷滴出的过程中，柱体上部要不断添加正己烷，千万注意不能让正己烷低于柱子的上筛板，避免空气进入柱子！将滴出的约5mL正己烷去除，不予收集。 4.3上样：将溶解好的油样添加到预活化好的氧化铝柱子中，注意操作过程中上筛板不能干涸。 4.4洗脱：添加80mL正己烷，用150mL的旋蒸瓶接收，直到80mL的正己烷完全自然滴出。如果苯并芘回收率不高，可以增加正己烷的洗脱体积，最多可至120mL。 操作过程中不需要加压或抽真空加快流速，让正己烷在重力作用下自然洗脱。 4.5将洗脱液在45℃水浴中旋转蒸发至干，如果仍然有油滴无法蒸干，说明净化不完全，需要向油滴中添加80mL的正己烷制得新样，取一根新柱重复上述净化过程； 4.6用总计10mL的正己烷分三次淋洗旋蒸瓶，合并淋洗液到氮吹管中，氮气吹干。添加300μL的正己烷到氮吹管中，在涡旋混合器上充分混匀。注意氮吹过程避免气流过大，造成液体溅出；涡旋过程避免正己烷蒸发。 4.7将上述300μL的正己烷转移至2mL进样瓶内插管中，进样分析。 色谱柱：Venusil ASB-C18，250mm×4.6mm，5.0μm； 流动相:乙腈：水 =88：12； 流速：1.0mL/min； 进样量：20μL； Add: 6th Floor, Incubator Centre, No.12 Taihua Road, 5th Street, TEDA,Tianjin 300457, China. Tel: +86227023*203 Fax: +8622 地址：中国天津开发区第5大街泰华路12号创业中心6层，300457 荧光检测器：发射波长406nm，激发波长384nm。 六、实验结果和讨论： 本方法的采用Cleanert BaP固相萃取柱用于某植物油苯并（a）芘的净化处理于5ug/kg添加水平可获得99.49%回收率，采用Venusil ASB-C18所得到的图谱见图1～3。 图1、 5μg/L苯并（a）芘的标准样品的色谱图 图2、某植物油的实