淀粉测定方法.pdfVIP

淀粉的测定方法（ 1） 测定食物中淀粉的方法有酶水解法、酸水解法、可消化淀粉和抗性淀粉的测定方法（酶 - 直接法） 一、酶水解法 1. 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用淀粉酶水解成双糖，再用盐酸将双糖水解成单糖， 最后按还原糖测定，并折算成淀粉。 2. 适用范围 ，适用于所有含淀粉的食物。 3. 仪器 （1 ） 回流冷凝器 （2 ） 水浴锅 4. 试剂 除特殊说明外，实验用水为蒸馏水，试剂为分析纯。 （1 ） 乙醚 （2 ） % 淀粉酶溶液：称取淀粉酶（ Sigma 公司， 3.2.1 ） g ，加 100 ml 水溶解，加入数滴甲苯或 三氯甲烷，防止长霉，贮于冰箱中。（注：配成溶液的淀粉酶破坏很快，最好邻用现配。） （3 ） 碘溶液：称取 g 碘化钾溶于 20 ml 水中，加入 g 碘，溶解后加水稀释至 100 ml 。 （4 ） 85 % 乙醇。 （5 ） 其余试剂同《蔗糖测定方法》 5. 操作方法 样品处理 称取 2 ～5 g 样品，置于放有折叠滤纸的漏斗内，先用 50 ml 乙醚分 5 次洗除脂肪（注：如果脂肪 含量少，此步骤可免），再用约 100 ml 85 % 乙醇洗去可溶性糖类（注：此步骤目的是去除可溶性糖）， 将残留物移入 250 ml 烧杯内，并用 50 ml 水洗滤纸及漏斗，洗液并入烧杯内，将烧杯置沸水浴上加热 15 min ，使淀粉糊化，放冷至 60 ℃以下，加 20 ml 淀粉酶溶液，再 55～60 ℃保温 1 h ，并时时搅拌（注： 温度过高，淀粉酶的活性破坏）。然后取 1 滴此液加 1 滴碘溶液，应不现兰色，若显兰色，再加热糊化并 加 20 ml 淀粉酶溶液，继续保温，直至加碘不显兰色为止。加热至沸，冷后移入 250 ml 容量瓶中，并加水 至刻度，混匀，过滤。（注：此时淀粉已水解成双糖，过滤可去除残渣和纤维素）弃去初滤液，取 50 ml 滤液，置于 250 ml 锥形瓶中，加 5 ml 6 mol/L 盐酸，装上回流冷凝器，在沸水浴中回流 1 h ，冷后加 2 滴甲基红指示剂，用 5mol/L 氢氧化钠溶液中和至中性，溶液转入 100 ml 容量瓶中，洗涤锥形瓶，洗液并 入 100 ml 容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。 （淀粉在沸水浴条件下糊化是淀粉水解的第一步反应，然后 在淀粉酶的作用下，分解成短链淀粉、糊精、麦芽糖等低聚合的糖，所以在淀粉酶解后需用酸进一步水解 得到葡萄糖。） 测定 按《还原糖的测定方法》操作。同时量取 50 ml 水及与样品处理时相同量的淀粉酶溶液，按同一 方法做试剂空白试验。 6. 计算 （A1-A2 ） × X1= ×100 ……………（ 1 ） V1 V3 m1× × ×1000 V2 100 式中： X1-- 样品中淀粉的含量， %； A1-- 测定用样品中还原糖的含量。 Mg； A2-- 试剂空白中还原糖的含量， mg； 还原糖（以葡萄糖计）换算成淀粉的换算系数； m1-- 称取样品质量， g ； V1-- 水解用样品溶液体积， ml； V2-- 样品定容总体积， ml； V3-- 测定用样品处理液的体积， ml 。 二、酸水解法 1. 原理 样品经除去脂肪及可溶性糖类后，其