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儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 1 1 材料与方法 2 2 结果 3 3 讨论 4 文2：三种肺炎支原体血清学检测方法比较 6 1 材料与方法 6 2 结果 7 3 讨论 7 参考文摘引言： 8 原创性声明（模板） 9 文章致谢（模板） 9 正文 儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 文1：儿童三种肺炎支原体检测法的临床应用分析 肺炎支原体（mycoplasma pneumoniae,MP）是婴幼儿、青少年急性呼吸道感染的主要病原体之一，临床上大多数表现为呼吸道感染综合征，其中约3%～10%可 发展 为支原体肺炎。但只根据临床症状很难鉴别由MP或病毒、细菌等病原体引起的儿童呼吸道感染，给临床治疗带来一定的困难。笔者采用3种MP检测法对362例临床拟诊为呼吸道（非细菌性）感染患儿的咽拭子和血清标本进行配对研究，通过病例回顾来探索对支原体肺炎敏感的实验室诊断方法，以协助临床准确做出诊治。 1 材料与方法 对象 收集湖南省儿童 医院 检验科2006年1月1日～9月30日在呼吸免疫科就诊住院患儿，有呼吸道感染症状，已经初诊为非细菌性感染的患儿362例作为研究对象，其中男175例，女187例；年龄为2个月～12岁，病程为1～90天。 方法 具体方法有：（1）用MP快速培养法、PCR法和MP-Ab法等3种MP检测法对362例研究对象同时进行检测，记录结果。（2）通过研究对象病历回顾统计MP感染的例数，并按年龄、病程和3种MP检测法结果进行统计学分析。 临床诊断MP感染的诊断标准 按 文献 ［1］、临床症状、体征标准，包括回顾性诊断——即患儿经红霉素治疗有效，经青霉素、头孢菌素治疗无效者等；以及实验室检查3种检测法至少有一种阳性。病程 计算 方法：以病历本记录为准，即在患儿开始有症状或体征时开始计算，到患儿来就诊检测时为止进行计算。 MP快速培养法 支原体分离鉴别培养液由珠海市浪峰生物技术有限公司提供。清晨患儿未洗漱前用咽拭子取咽部分泌物，严格按说明书进行，将咽拭子用无菌生理盐水处理，接种到预温的培养基中，37 ℃培养；培养基液体颜色由紫红色变为草绿色或嫩绿色且清亮，并且在静置时，瓶底有蓝色颗粒或物质沉淀为阳性，5天后培养基颜色不变或无蓝色颗粒或物质沉淀为阴性。PCR法：试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供。应用PCR法检测MP-DNA，严格按试剂盒说明书进行，以在紫外灯下出现180 bp扩增带结果判为阳性。每次试验均设阳性、阴性对照（阳性对照为MP质粒，阴性对照为无菌生理盐水），由专人进行操作，质量控制。MP-Ab法：试剂为日本瑞必欧株式会社MP-Ab检测试剂SERODIA-MYCOⅡ凝集试验试剂盒，严格按试剂盒说明书操作，抽取患儿静脉血3 ml，采用明胶颗粒被动凝集法，用血清检测，结果以≥1∶40判断为阳性。每次试验均设未致敏明胶颗粒、致敏明胶颗粒和阳性、阴性血清进行测定。 统计学方法 计量资料用均数±标准差（x±s）表示，各年龄组与3种检测方法结果比较用Spearman检验；各年龄组间确诊病例的阳性率比较用χ2检验；3种检测方法阳性结果与病程之间的比较用q检验。 2 结果 阳性样本 经过回顾性诊断，在配对研究组362例研究对象中有152例符合MP感染的诊断标准，即有152例确诊病例，其中肺炎45例，支气管炎56例，上呼吸感染49例，支气管哮喘2例。MP快速培养法检测出78例阳性，PCR法检测出103例阳性，MP-Ab法检测出127例阳性。 结果分析 各确诊病例的年龄分布，见表1。表1显示儿童MP感染的年龄以3～4岁年龄段的病例最多，为46例，阳性率最高，为%，与其余年龄组段比较P。3种检测法的阳性检测结果与年龄分布见表1，表1显示3种检测法与年龄之间差异无统计学意义，以3～4岁的年龄段与其余年龄组段比较差异无统计学意义，P。不同病程患儿3种检测法的检测结果，见表2，表2显示MP快速培养法为阳性的患儿病程均值较短为（±）天，PCR法为阳性的患儿病程均值为（±）天，MP-Ab法为阳性的患儿病程均值较长为（±）天。3组之间两两比较，差异有统计学意义（P）。表1 不同年龄组MP感染确诊病例和3种检测方法结果对比分析注：△□代表与年龄组3～4岁组段比较结果表2 不同病程患儿3种检测方法阳性结果对比分析注：△代表三组之间的两两比较 3 讨论 MP感染的临床表现常无特异性，临床的实际工作中，容易与一般病毒性感冒相混淆。在临床上患儿有下列症状：（1）发热呈弛张热或不规则热。刺激性咳嗽非脓性痰，偶带血丝。（2）可有咽痛、头痛、胸痛，全身症状比体征明显。（3