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第十五章DNA损伤与修复 CHAPTER 15 DNA Damage and Repair第一节 DNA损伤各种体内外因素所导致的DNA组成与结构的变化称为DNA损伤(DNA damage)损伤可导致两种后果：DNA结构的永久改变，即突变DNA失去作为转录和复制模板的功能DNA 修复机制短期效应生理功能紊乱异常增生和代谢细胞死亡细胞增殖减少基因表达异常基因组不稳定信号传导异常长期效应老化肿瘤疾病DNA损伤的后果DNA损伤修复的重要性DNA存储着生物体赖以生存和繁衍的遗传信息，维护DNA分子的完整性对细胞至关紧要修复DNA损伤的能力是生物能保持遗传稳定性之奥秘所在； DNA分子的变化并不是全部都能被修复成原样的，因此生物才会有变异、有进化。一、DNA损伤的引发因素（一）DNA的自发性损伤DNA复制错误：如碱基错配（mismatch），片段的插入和缺失使重复片段拷贝数变化碱基的自发突变：脱氨基或碱基丢失机体代谢产物对DNA的损伤：如活性氧（ROS）（1） DNA复制中的错误 在DNA复制中，碱基的异构互变、4种dNTP之间浓度的不平衡等均可引起碱基的错配。碱基配对的错误概率约为10-1_10-2；DNA聚合酶的校对作用等因素作用下，错配率仍在10-10。 （2）碱基的脱氨基作用 碱基的环外氨基自发脱落，C变为U，A变为次黄嘌呤（I ），G变为黄嘌呤（X） 。 复制时，U与A配对、I和X都与C配对会导致子代DNA序列的错误变化。（3） 脱嘌呤与脱嘧啶 (碱基丢失) 自发水解使嘌呤和嘧啶从DNA链的核糖磷酸骨架上脱落。哺乳类动物细胞，在30oC下，20h内DNA链自发脱落嘌呤约1000个，嘧啶约500个。（4）活性氧引起的碱基修饰与链断裂 细胞呼吸的副产物O2-, H2O2造成DNA损伤，产生一些碱基修饰物（如产生8-羟基脱氧鸟嘌呤等），还可引起DNA单链断裂等损伤; 这些损失的积累可导致老化。8-OHdG是DNA氧化损伤的主要产物之一。 是公认的内源性及外源性因素对DNA氧化损伤的生物标志物。二. 物理因素引起的DNA损伤（1）紫外线（UV）引起的DNA损伤 DNA受到大剂量紫外线（260nm）照射时，同一条链上相邻的嘧啶以共价键连成二聚体；TT, CC, CT之间都可形成二聚体。复制时，此处产生空耗过程，DNA不能复制，细胞不能分裂，导致凋亡。紫外线引起的DNA损伤－－最易形成胸腺嘧啶二聚体（TT）（2） 电离辐射直接效应：DNA直接吸收射线能量而遭损伤。间接效应：DNA周围其他分子（主要是水分子）吸收射线能 量产生高活性自由基进而损伤DNA。结果：DNA的碱基损伤、DNA链断裂、交联。 DNA链断裂：电离辐射引起的严重损伤，断链数随照射剂量而增加。 单链断裂 双链断裂 单断发生频率为双断的10-20倍，但还比较容易修复；对单倍体细胞（如细菌）一次双断就是致死事件。 损伤严重的碎片DNA无法修复，则不只属于突变，可导致细胞走向死亡。癌症放疗的原理就在于此。交联包括DNA链交联和DNA-蛋白质交联。 同一条DNA链上或两条DNA链上的硷基间可以共价键结合，DNA与蛋白质之间也会以共价键相连 这些交联是细胞受电离辐射后在显微镜下看到的染色体畸变的分子基础，会影响细胞的功能和DNA复制。 损伤交联DNA链的交联：两条双链DNA这种“X”型的交联，导致染色体畸变，细胞容易死亡。三. 化学因素引起的DNA损伤（1）碱基类似物、修饰剂对DNA的损伤（2）烷基剂对DNA的损伤（3）嵌合剂对DNA的损伤(1) 碱基类似物对DNA的损伤 某些化学物质和正常的碱基在结构上类似，有时会替代正常碱基而掺入DNA分子，一旦这些碱基类似物进人DNA后，由于它们的配对能力不同于正常碱基，便引起DNA复制过程中其对应位置上插入不正确碱基。　肿瘤化疗药物　例如 5-溴尿嘧啶（BU）和 5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）是T结构类似物。细菌在含BU的培养基中培养时，部分DNA中的T被BU取代，BU有两种互变异构体，一种是酮式结构（第6位上有一个酮基），它可以代替T而掺入DNA，并与A配对；当BU发生互变异构成为烯醇式（第6位上是一个羟基）后，就容易和G配对。 通常以酮式存在，有时也以烯醇式存在。当BU先以酮式掺入DNA，继而又变成烯醇式时，进一步复制使DNA中 A- T对变成 G-C对。同样道理也引起 G-C向 A-T的转换，BU可以使细菌的突变率提高近万倍。(2) 烷化剂引起的DNA损伤（特异性错配） 某些诱变剂不掺入DNA，而通过改变碱基的结构从而引起特异性错配，如烷化剂（是一类亲电子的化合物，具有一个或多个活性烷基）。它们的诱变作用是使DNA中的碱基烷化。 活性烷基不稳定，能转移到其他分子的电子密度较高的位置上，并置换其中的氢原