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DNA基本技术专题知识;第一节 核酸印迹技术与分子杂交;什么是核酸分子杂交 ;一、Southern 印迹可用于分析基因拷贝数 改变;Southern印迹分析基础步骤;二、Northern 印迹和RT-PCR可用于分析基因转录水平 改变;三、原位分子杂交技术可用于基因及其表示产物 定位分析;FISH;第二节 聚合酶链式反应;什么是聚合酶链式反应;PCR技术 工作原理;25~30 次循环后, 模板DNA得到扩增;一、PCR技术分析基因及其产物;mRNA 5?;二、PCR技术能够进行实时、定量分析;三、PCR结合免疫沉淀扩增与蛋白质结合 DNA序列;第三节 DNA序列测定;* DNA序列分析方法 演变和发展;一、DNA序列分析有双脱氧链终止法和化学裂解法;双脱氧链终止法;G;DNA序列自动分析;二、DNA序列分析能够揭示基因和基因组一级结构改变;第四节 DNA芯片技术;什么是DNA芯片技术;基因芯片工作步骤;一、利用DNA芯片技术可同时进行高通量基因转录活性 分析;二、染色质免疫共沉淀与芯片技术结合检测蛋白质-DNA相互作用;ChIP-on-chip工作原理;第五节 酵母及哺乳动物细胞杂交系统;一、酵母双杂交探测蛋白-蛋白 相互作用;酵母双杂交技术 基础原理;二、酵母单杂交系统需要构建“汇报”细胞;酵母单杂交技术 基础原理;三、蛋白质-RNA相互作用也可采取酵母三杂交系统进行分析;酵母三杂交基础原理 ;(二)酵母三杂交系统应用范围广泛
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