应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变（临床医学资料）.doc

应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变（临床医学资料） 文档信息 属性： F-01NHT6，doc格式，正文24507字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学资料、临床医学资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变 2 1 材料与方法 3 2 结果 4 2种常见AGT基因突变位点的基因分型结果 4 3 讨论 4 文2：应用等位基因特异性PCR检测胆固醇酯转运蛋白基因突变 6 1 材料与方法 7 2 结果与分析 8 6种常见CETP基因突变位点的基因分型结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 12 原创性声明（模板） 13 文章致谢（模板） 14 正文 应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变（临床医学资料） 文1：应用等位基因特异性PCR检测血管紧张素原基因突变 [ABSTRACT] Objective: To establish the allele specific polymerase chain reaction (ASPCR) technique for the detection of 2 normal mutatio of angioteinogen (AGT) gene. Methods: Designed ASPCR system was used to detect the mutatio in Li and Han nationalities of Hainan province towards 2 common mutatio of AGT gene, T174M and M235T. The sequence of the ASPCR sample was detected simultaneously. Results: Three genotypes were successfully detected in T174M mutation site which were TT, TM and MM, and 3 genotypes were successfully detected in M235T mutation site which were MM, MT and TT. All the results above provided by the ASPCR were exactly coistent with the sequencing results. Conclusion: The ASPCR with advantages of stability and simplify is an effective method for investigation of the mutatio of AGT gene. [KEY WORDS] Angioteinogen (AGT) gene; Allele specific (AS); Polymerase chain reaction (PCR); Genotyping 肾素血管紧张素系统(reninangioteis system,RAS)对维持血管张力和平衡血压起到了重要的调节作用，作为血管紧张素前体、唯一的肾素作用底物——血管紧张素原(angioteinogen，AGT)与心脑血管疾病的关系日益受到人们的重视。近年来研究表明，AGT基因与原发性高血压、冠心病和脑梗塞等疾病相关[1-3]。为了研究海南汉、黎族人群中AGT基因T174M和M235T的多态性，笔者建立了简便、快速检测AGT基因上述2种突变的等位基因特异性PCR技术，现将结果报告如下。 1 材料与方法 DNA样品 用EDTA抗凝，从海南省海口市随机采集海南籍汉族正常人群血液样本193份，从海南省昌江和陵水等市县随机采集海南籍黎族正常人群的血液样本153份，以上样本均为血缘上的无关个体，按Lahiri等[4]方法提取DNA。 等位基因特异性PCR扩增AGT基因 引物的设计与合成 从Genbank中获得人类AGT基因的DNA全序列和mRNA序列，用PCR DESN软件辅助设计引物，并委托上海生工生物工程技术服务有限公司合成，引物序列见表1。表1 等位基因特异性PCR的引物序列及扩增片段长度 PCR扩增 每个多态位点均设立2个PCR检测管，分别加入寡核苷酸正常和突变引物用于检测每个多态位点正常和突变的等位基因。反应体系如下：每管在1×PCR缓冲液(10mmol/L TrisHCl，， 50mmol