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第一页,共23页 2.1植物细胞工程 教学目标 1.简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。 2. 列举植物细胞工程的实际应用。 第二页,共23页 一、植物细胞工程的理论基础和基本技术 植物细胞工程的理论基础是:植物细胞的全能性 植物细胞工程常用的技术是 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞全能性的概念:细胞的全能性是指生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 植物细胞具有全能性的原因:是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质及发育为完整个体所必需的全部基因。 第三页,共23页 (一)植物细胞工程的理论基础——细胞的全能性 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。 在生物的个体发育中,由于基因在特定时间和空间下选择性地表达而形成不同器官,因此,要实现细胞的全能性,首先必须使生物体的细胞处于离体状态。 植物细胞>动物细胞 受精卵>生殖细胞> 分化程度低的体细胞> 分化程度高 细胞全能性大小: 第四页,共23页 第五页,共23页 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、根芽,最终形成完整的植株。 (1)、概念 (二)植物细胞工程的基本技术之——植物组织培养技术 第六页,共23页 1、离体的植物器官、组织或细胞(外植体)(已分化) 脱分化(又叫去分化) 2、愈伤组织(排列疏松而无规则,高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞,未分化) 再分化 3、丛芽(胚状体) 4、幼苗 植物组织培养的条件: 适宜的养料和激素,适宜的温度和无菌条件 (2)、过程 5、植物体 无菌条件 黑暗 光照 叶绿素合成需要光照及光照可诱导分化 生长素多,细胞分裂素少促进生根;反之促进发芽。 培养基成分:碳源(如蔗糖)、氮源(如氨基酸)、激素、水、无机盐等 第七页,共23页 (3)、相关问题 1、在植物组培过程中,为什么要进行一系列的消毒,灭菌,并且要求无菌操作? 2、为什么切取胡萝卜根的形成层,其他部分也能培养成小植株吗? 3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养? 1、因为植物组织培养用的培养基中富含各种营养成分,各种杂菌易于生长,常发生污染现象。杂菌争夺营养,且产生有害物质,导致培养物死亡。 2、可以。利用其它组织(茎、叶、花)进行植物组织培养进行验证。 3、脱分化形成愈伤组织阶段,会暗培养以利于细胞的脱分化产生愈伤组织;而光照会诱导分化产生维管组织,不利于生成愈伤组织。 再分化阶段需要一定的光照诱导分化,及形成叶绿素等。 第八页,共23页 (1)两个物种不能杂交的原因是?要想让两个来自不同植物的体细胞融合在一起,遇到的第一个障碍是什么? (2)有没有一种温和的去细胞壁的方法? (3)为什么两个原生质体能发生融合,这与细胞膜的什么特性有关? (4)如果两个来源不同的原生质体发生融合形成了杂种细胞,下一步该对此细胞做何种处理? (5)如何将杂种细胞培育成杂种植株? 1、相关问题 (二)植物细胞工程的基本技术之——植物体细胞杂交 第九页,共23页 将不同种植物的体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 (优点/意义:克服了远缘杂交不亲和性) 2、概念 第十页,共23页 植物细胞A 植物细胞B 酶解法去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 融合完成的标志: 再生出细胞壁 实质:核的融合 筛选出杂种细胞 脱分化 再分化 愈伤组织 杂种植株 3、过程 纤维素酶、果胶酶等 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG)等 标志植物体细胞杂交完成 第十一页,共23页 问题 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样,地上长番茄、地下结马铃薯? 主要原因是:生物基因的表达不是孤立的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互干扰,不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达,杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 第十二页,共23页 问题 自然界中有一种含有叶绿体的原生动物──眼虫,说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,请探讨:动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?如果理论上可行,请设计出具体实验方案。 第十三页,共23页 练习:右图为植物体细胞杂交过程 示意图。据图回答: 1)植物体细胞杂交的目的是获得 新的杂种植株
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