HPV的检测及其临床应用.pptVIP

* * * * * * * 不同年龄组中HPV感染和宫颈癌的发生率 HPV感染在年轻的妇女中非常普遍，但随着年龄的增加，大部分妇女都能把病毒排掉，同时产生抵抗力，所以35岁后的妇女HPV感染率明显下降。随着年龄增加，那些不排掉病毒的持续感染妇女，其宫颈癌的发病率就明显上升。 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 宫颈上皮细胞发生异常和瘤变的进化过程 基底细胞膜 正常 轻度 中度 原位 鳞状 细胞 癌变 上皮 变型 HSIL 细胞异型 CIN1 CIN2 CIN3 LSIL 巴氏涂片 活检 。 精选文档 HPV致宫颈癌进展示意图 LSIL LSIL CIS CA 8—10年〔100%治愈〕 2—5年〔死亡〕 正常 低度 病变 高度 病变 原位癌 浸润癌 。 精选文档 关于HPV感染 HPV感染多数不开展成为宫颈癌，可以在9-16(8-10)个月消失; 间隔半年2次HPV〔＋〕; HPV持续感染; 28%的持续感染者,在2年内开展为CIN I；70% 的持续感染者4年内开展为CINII; 。 精选文档 HPV实验室检测 。 精选文档 　临床常用的HPV检测方法 病理学检查 细胞学检查 免疫组化检测 原位杂交技术检测 聚合酶链反响( PCR)技术　 DNA芯片分型检测 杂交捕获DNA分析 。 精选文档 病理学检查 鳞状上皮疣状乳头状增生 表皮角化不全 棘层不规那么增厚 基底层增生 上皮脚延长 中表层出现灶状分布的挖空细胞等。 。 精选文档 　细胞学检查 凹空细胞、角化不良及湿疣外底层细胞 细胞学诊断HPV感染敏感性较差 。 精选文档 　 免疫组化检测 检测HPV的衣壳抗原来进一步明确HPV感染 所得阳性反响定位明确,判断可靠 必须在HPV-DNA 复制成熟后才有衣壳装备 敏感性较低 。 精选文档 原位分子杂交 用来测定基因或特定核苷酸序列在核酸分子的所在部位，检测重组体DNA〕 通过非放射性探针对石蜡组织进展检测,能作定位检测,假阳性率低,但灵敏度不高,大大降低了临床使用价值。 。 精选文档 　聚合酶链反响( PCR)技术 设计与HPV-DNA互补的一对特异性核苷酸引物,以HPV-DNA为模板以指数增长的速率进展体外扩增 敏感性最高,可对HPV进展分型,测定病毒载量,发现新基因型,对基因进展序列分析 缺点为样品间易穿插污染导致假阳性 。 精选文档 　杂交捕获DNA分析 标本中的HPV-DNA 与液相中的RNA探针结合,形成特异性的RNA-DNA杂交体,被微孔板内的特异抗体所捕获,然后被所加的发光底物检测,其发光的强度与标本中的DNA 量成比例,因而可对HPV进展半定量检测 效率高,适于大量人群检测,临床上操作简便 。 精选文档 DNA裂解 → RNA-DNA杂交→ 抗体捕获 → 化学发光 → 计算机判读 裂解 参加探针 杂交 参加二抗和发光剂 。 精选文档 hC2方法，特异性强，准确率高，并能做到定量，但不能分出亚型。芯片技术，可在一样的条件下，分出亚型，但不能定量。因此， HPV亚型分类和定量检测研究将成为今后的重要课题。亚型和量化，可能对疾病的演变和转归提供更有利的证据。 。 精选文档 　 宫颈癌的筛查 。 精选文档 筛查对象 21岁以上有性生活史或具有性生活三年以上的任何妇女。 高危人群：有多个性伴侣、性生活过早、HIV / HPV感染、机体免疫功能低下、卫生条件差/性保健知识缺乏。 某些情况无需进展筛查，如因良性疾病摘除子宫的妇女。 。 精选文档 起始年龄：　　在我国经济兴旺地区为25－30岁；经济欠兴旺地区为35－40岁。对于高危妇女人群，筛查起始年龄应适当提前。 终止年龄：　　65岁后患子宫颈癌的危险性极低，故一般不主张对65岁以上的妇女进展子宫颈癌筛查。 。 精选文档 筛查间隔 1、每年一次细胞学检查，连续2次〔-〕， 可3年一次 2、连续2次HPV〔-〕，细胞学检查〔-〕 可5～8年一次 3、高危人群：最好每年一次 〔CIN及以上、特殊职业、30岁以上高危HPV感