实验三 植物组织RNA的提取与分析.pptVIP

2021/3/8 2021/3/8 * 实验三 植物组织RNA的提取与鉴定 2021/3/8 * （1）通过本实验，了解RNA的结构和特点。 （2）学会使用Trizol法提取植物总RNA。 （3）学习和掌握总RNA的检测实验技术和实验原理。 一、实验目的 2021/3/8 二、实验原理 RNA的提取是进行分子克隆和基因表达分析等研究的基础。但RNA很容易被内源及外源的RNase降解，所以要得到未被降解的、不含DNA与其它杂质的RNA是进行分子生物学研究的前提。 目前较为成熟的分离RNA的方法有许多，用于植物细胞总RNA的提取主要有苯酚法、异硫氰酸胍法、氯化锂沉淀法、SDS/酚抽提法，或应用商品化的Trizol试剂和Qiagen等各类试剂盒进行提取。但由于植物细胞具有坚硬的细胞壁，内含较多的多糖、脂质、多酚等次生代谢物，同种植物的不同组织和不同植物的同种组织材料，其RNA的提取方法也会有很大差异。适宜的RNA提取材料处理方法也不尽相同。 2021/3/8 二、实验原理 Trizol试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂，在匀浆和裂解过程中，能在破碎细胞、降解细胞其它成分的同时保持RNA的完整性。在氯仿抽提、离心分离后，RNA处于水相中，将水相转管后用异丙醇沉淀RNA。 用这种方