蛋白质和多肽的氨基酸序列分析课件.pptVIP

六、C端蛋白质序列仪 C端序列仪一般由N端序列仪改装而成，其基本结构与后者相似，两者的不同之处主要在于: (1) 反应所用的试剂不同，因此两者不可兼容，否则极易堵塞管道。 (2) 在C端序列仪中，所有的化学反应均在弹筒型反应室中进行，切割下来的ATH-AA仅在转化腔内干燥和溶解后即进入HPLC系统分离分析。而在N端测序仪中，ATZ-AA需在转化腔中转化为PTH-AA。 * 学习交流PPT * 学习交流PPT 七、C端测序样品前处理 C端测序样品的纯度鉴定和疏基修饰方法与N端测序基本相同。 下面介绍C端测序样品的脱盐和游离氨基的衍生。 * 学习交流PPT (1)脱盐的方法： 目前使用最普遍的C端脱盐方法是采用ProSorb装置，ProSorb的结构及使用方法与ProSpin大致相同，不同的是用filter代替了ProSpin中的离心管，fliter可将样品中的小分子物质随水分一起吸收，以达到脱盐和浓缩样品的目的。 (2)ε-氨基的衍生 为了使Lys-ATH衍生物获得更好的分离效果，需先将蛋白质或多肽中Lys的ε-氨基与Phenylisocyanate (PhNCO)反应成衍生物 * 学习交流PPT 八、影响C端测序反应产率