药物分析-第十一章抗生素类药物的分析.pptVIP

一、概述 1.抗生素（antibiotics）： 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物） 2.分类 β–内酰胺类 氨基糖苷类 四环素类 大环内酯类 多烯大环类 多肽类 第一页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 3.来源： 生物合成（发酵） 化学合成或半合成 4.抗生素的特点： 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差 生产工艺复杂 发酵过程不易控制易受污染 第二页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 5.抗生素质量分析 采用生物学法与物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合,灵敏度高；但操作复杂费时 理化方法：准确度与专属性较高, 且操作简便；但与临床疗效有偏差 第三页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 二、 β–内酰胺类 包括青霉素类和头孢菌素类 1.化学结构： 青霉素类：6-APA为母核 头孢菌素类：7-ACA为母核 * * * * * 第四页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 2. 主要理化性质： 1）酸性（羧基）： pKa 2.5-2.8 酸性较强 与碱金属成盐后水溶性好 2） UV（共轭）： 青霉素类：苯环取代基 头孢菌素类：母核有共轭结构 第五页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 3）旋光性： 有多个手性碳 4）稳定性（内酰胺）： 干燥条件较稳定，溶液不稳定 青霉素 降解、失效 氧化剂、酸、碱 酶、金属离子、Δ 第六页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 3. 鉴别 1）羟肟酸铁反应： β–内酰胺类 羟肟酸 显色 2）茚三酮反应 α-氨基 蓝紫色 3）双缩脲反应 β–内酰胺类 紫色 4）光谱法（UV、NMR） 5）色谱法（HPLC、TLC） NH2OH·HCl NaOH Fe3+ H+ 茚三酮 Δ 碱性酒石酸铜 呈色反应 第七页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 头孢利定的NMR鉴别法(JP14) 取本品50mg溶于0.5ml重水中，测定NMR光谱时，应显示 δ3.8 附近 δ6.9～7.5 δ7.9～9.0 单峰信号 多重峰信号 多重峰信号 2 ： 3 ： 5 强度比 第八页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 头孢氨苄鉴别的TLC条件 ChP(2000) 5mg/ml 2μl 硅胶G 0.1mol/L枸橼酸液-0.2mol/LNa2HPO4-丙酮(120:80:3)；0.1%茚三酮溶液显色 USP(24) 25mg/ml 5μl 硅胶 醋酸乙酯-水-乙腈-冰HAc(48:18:14:14)；短波长UV光检出 BP(1999) 0.4%(W/V) 1μl 硅烷化硅胶HF254 15.4% NH4Ac(pH6.2)-丙酮(85:15)；254nm检出 第九页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 4.特殊杂质检查 聚合物、有关物质、异构体等 头孢他啶中聚合物测定 色谱条件与系统适用性试验 用葡聚糖凝胶G-10（40～120?m）为填充剂，玻璃柱内径1.3～1.5cm，床体积50～60ml；流动相A为含3.5%硫酸铵的0.01mol/L磷酸盐缓冲液（取磷酸氢二钠2.19g和磷酸二氢钠0.54g，加水1000ml使溶解，调节pH至7.0），流动相B为0.01%十二烷基硫酸钠溶液；流速为每分钟1ml；检测波长为254nm。以流动相A为流动相，用1mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液进样200?l进行测定，理论板数应不低于900，拖尾因子在0.75～1.5，对照品溶液以流动相B为流动相，重复进样200?l，峰面积值的相对标准差应小于5.0% 第十页，编辑于星期三：十六点 五十二分。 对照品溶液的制备：取头孢他啶对照品适量，精密称定，加水制成每1ml中含头孢他啶100?g的溶液，摇匀 测定法 取本品适量，精密称定，加水制成每1ml中约含头孢他啶20mg的溶液，立即进样200?l，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另取对照品溶液200?l注入液相色谱仪，以流动相B为流动相，记录色谱图，按外标法计算，本品含头孢他啶聚合物以头孢他