微生物的遗传变异和育种 (3).pptVIP

* （三）接合(conjugation) 通过细胞与细胞的直接接触而产生的遗传信息的转移和重组过程 第61页，共82页，编辑于2022年，星期日 * 第62页，共82页，编辑于2022年，星期日 * F–因子（fertility factor）：又称致育因子或性因子，大肠杆菌中发现，含质粒为F+（♂）；无质粒为F-（♀）；质粒DNA整合到染色体上为Hfr。62×106Dalton，100kb，相当于核染色体DNA 2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关。存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中，决定性别。 第63页，共82页，编辑于2022年，星期日 * F因子的存在方式 第64页，共82页，编辑于2022年，星期日 * 接合中断试验与染色体图： Hfr菌株与F– 菌株接合与F+ 菌株相似，区别在于F因子被分隔在核染色体组两端，F因子的头先进入受体细胞，然后是核染色体组，只有核染色体组完全进入受体细胞之后，F因子的尾才能进入受体菌细胞，完成DNA的传递。 Hfr菌株与F– 菌株的接合随时都可能被中断，所以极少出现转性的结果，而是形成各种各样的重组子。 接合中断试验：由Wollman和Jacob首创（1955），首先认识了原核微生物染色体的环状特性。 原理：接合试验的DNA转移过程存在着严格的顺序性，在接合进行中采用定时人为中断的方法，可以获得呈现不同数量 Hfr 性状的 F– 接合子，据此，可以选定几种有特定整合位点的 Hfr 菌株，使之与F–菌株进行接合，并在不同时间使其中断，最后，根据F–中出现Hfr菌株中各种形状的时间顺序（分钟），可以绘出较为完整的环状染色体图（chromosome map）。 到1983年E. coli染色体上已定位1027个基因。 第65页，共82页，编辑于2022年，星期日 * 痢疾杆菌耐药信息携带在质粒上。最初发现于痢疾志贺氏菌（Shigella dysenteriae），后来发现还存在于Salmonella、Bacillus、Pseudomonas和Proteus中。 R因子由相连的两个DNA片段组成，即抗性转移因子（resistence transfor factor， RTF ）和抗性决定R因子（r-determinant），RTF为分子量约为11×106Dalton，控制质粒copy数及复制，抗性决定质粒大小不固定，从几百万到100×106Dalton以上。其上带有其它抗生素的抗性基因。 R-因子在细胞内的copy数可从1~2个到几十个，分为严紧型和松弛型两种，经氯霉素处理后，松弛型质粒可达2000~3000个/细胞。 1. R因子（resistence factor） 第66页，共82页，编辑于2022年，星期日 * 降解性质粒 只在假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码，从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟脑）质粒，XYL（二甲苯）质粒，SAL（水杨酸）质粒，MDL（扁桃酸）质粒，，NAP（萘）质粒和TOL（甲苯）质粒等。 2. 降解性质粒 第67页，共82页，编辑于2022年，星期日 * （四）原生质体融合 通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程，又称细胞融合。 第68页，共82页，编辑于2022年，星期日 第四节 基因工程在环境工程中的应用 一、诱变育种 就是利用物理、化学等因素，诱发基因突变，并从中筛选出具有某一优良性状的突变体。 诱变育种一般包括以下主要步骤 (1)出发菌株的选择 (2)诱变剂的选择 (3)诱变剂量的选择 (4)突变体的筛选 第69页，共82页，编辑于2022年，星期日 二、质 粒 育 种 第70页，共82页，编辑于2022年，星期日 大肠杆菌70s核糖体示意图 第29页，共82页，编辑于2022年，星期日 蛋白质合成 氨基酸的活化 肽链的形成（包括肽链合成的起始、延长和终止） 肽链的释放 AA+tRNA+ATP 氨酰-tRNA合成酶 氨酰-tRNA+AMP+PPi 第30页，共82页，编辑于2022年，星期日 第二节 微生物的突变 突变的原因 随着科学的发展，人们越来越清楚地认识到，突变是DNA分子中碱基对发生变化的结果。即由于某些原因，引起DNA分子碱基的缺失、置换或插入，改变了基因内部原有的排列顺序和数目，从而引起微生物性状的改变，并能够遗传给子代。所以，突变往往发生在DNA的复制过程中。 DNA分子中碱基对的变化可以在自然条件下自发进行，也可以人为地诱发引起。因此，从发生突变的原因来看