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灭菌、消毒、防腐、化疗的比较 比 较 项 目 灭 菌 消 毒 防 腐 化 疗 处理因素 强烈理化因素 温和理化因素 理化因素 化学治疗剂 处理对象 任何物体内外 生物体表,酒、乳等 有机质物体内外 宿主体内 微生物类型 一切微生物 有关病原菌 一切微生物 有关病原菌 对微生物作用 彻底杀灭 杀死或抑制 抑制或杀死 抑制或杀死 实例 加压蒸汽灭菌,辐射灭菌,化学杀菌剂 70%酒精消毒,巴氏消毒法 冷藏。干燥,糖渍,腌,缺氧,化学防腐剂 抗生素,抗代谢药物 第62页,共89页,编辑于2022年,星期日 二、物理灭菌—高温 物理灭菌因素: 高温 辐射 超声波 微波 激光 静高压 过滤除菌 第63页,共89页,编辑于2022年,星期日 (一)高温灭菌的种类 原理 通过热杀效应(heat-killing efficiency)作用,引起蛋白质、核酸和脂类等重要生物大分子发生降解或改变其空间结构等,从而变性或破坏。 热死点 又称致死温度(thermal death point ,TDP),指的是一定时间内(10min)杀死某微生物(水悬浮液群体)所需要的最低温度。 热死时间(thermal death time ,TDT) 在特定的环境条件和特定的温度条件下,杀死某种微生物(水悬浮液群体)所需要的时间。 D值( D value or decimal reduction time,D) 在一定温度下杀死样品中90%的微生物所需要的时间。 the time required to kill 90% of the microorganisms or spores in a sample at a specified temperature. 杀菌温度的范围广泛 第64页,共89页,编辑于2022年,星期日 第65页,共89页,编辑于2022年,星期日 An exponential plot of the survivors versus the minutes of exposure to heating at 121℃. In this example the D121 value is 1 minute. The Pattern of Microbial Death. 第66页,共89页,编辑于2022年,星期日 连续培养的方法 1、恒浊培养法 利用恒浊器(Turbidostat)的光电控制系统(浊度计)来监测培养液的浊度(菌液浓度),如果培养器中浊度高于预定浊度范围,通过光电控制系统的调节加快培养液流速,反之则减慢流速,从而获得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养液的连续培养的方法。 特点: 菌体密度高,微生物始终以最高生长速率生长 在生产上可获得大量菌体或与菌体生长相平行的代谢产物如乳酸。 第30页,共89页,编辑于2022年,星期日 2、?恒化培养法? ?在恒化器(Chemostat)中保持培养液流速不变,使微生物始终在低于最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养方法。 常通过控制某一种限制性营养物浓度,达到微生物的生长速率正好与恒速加入的新鲜培养基流速相平衡。 可获得生长速率的均一菌体,又可获得低于最高菌体产量,但能保持稳定菌体密度的菌体。 新鲜培养基 控制阀 Chemostat Dilution Rate and Microbial Growth. * 第31页,共89页,编辑于2022年,星期日 连续发酵的优点: 高效,简化生产工艺,缩短生产时间和提高设备的利用效率, 自控性?,仪表自动控制。 产品质量较稳定。 节约。 连续发酵的缺点: 菌种易于退化,微生物长期处于高速繁殖状态,易发生变异。 容易污染,“连续”是有时间限制的,一般可达数月至一年、两年。 营养物的利用率低于分批培养。 第32页,共89页,编辑于2022年,星期日 四、高密度培养 高密度培养(high-cell-density culture,HCDC) 又称高密度发酵,指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常规培养培养的10倍以上的生长状态或培养技术。 不同菌种和同种不同菌株间,达到高密度的水平差别极大。 高密度培养的方法 选取最佳培养基成分和各成分含量 补料 提高溶解氧浓度 防止有害代谢产物的生成 第33页,共89页,编辑于2022年,星期日 第三节 影响微生物生长的因素 影响微生物生长的主要因素 营养条件 水 温度 pH 氧气 …… 第34页,共89页,编辑于2022年,星期日 一、水 活度(性)水(aw) 在密闭容器内含有水溶性物质的蒸汽压与相同条件下纯水蒸汽压的比值。0≤ aw ≤1。 以纯水的蒸汽压为P0,水溶性物质的蒸汽压为P,不含任何固形物成分的纯水的P= P0,即aw=1。 绝对不含水分的物品的 P=0,即aw=0。
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