谈体液平衡与血清钠、钾、氯测定.pptVIP

血清钠、钾的测定 检测时首先加入样品，测其电位，然后加入标准液测其电位，二者之差值与样本中钠、钾离子浓度和它们在标准液中的浓度之比存在对数关系，可根据能斯特方程计算出样品中的钠、钾离子浓度。 第三十一页，共六十六页。 血清钠、钾的测定 用离子选择性电极电位测定钠、钾方法有二种: 1.直接电位法 2.间接电位法 第三十二页，共六十六页。 血清钠、钾的测定 直接电位法 应用的血清、血浆或标准液不经稀释直接进入仪器测量管道作电位分析,离子选择电极只对水相中活化离子产生选择性响应，与标本中脂肪，蛋白所占据的体积无关，故此法能真实反映符合生理意义的血清中离子活度。 第三十三页，共六十六页。 血清钠、钾的测定 间接电位法 标本和标准液要用指定离子强度及pH的稀释液作一定比例的稀释，再送入电极管道中测量其电位。 该方法会受到样品中脂类和蛋白质占据体积的影响。 第三十四页，共六十六页。 血清钠、钾的测定 一些没有电解质失调而有严重的高血脂和高蛋白血症的血清样品，由于每单位体积血清中水量明显减少，定量吸取样品作稀释后，间接电位法测定会得到假性低钠、钾血症。 文献报告，健康人间接电位法比直接电位法约低2%～4%。 第三十五页，共六十六页。 血清钠、钾的测定 3．酶动力学法 Na+的测定主要应用钠-依赖性β-半乳糖苷酶，测定K+则应用钾-依赖性丙酮酸激酶。 稳定性好，易于自动化，可利用全自动生化分析仪对钠钾同时测定，适合于急诊及常规检查，具有很好的发展前景。 第三十六页，共六十六页。 参考范围 血清钠 135～145mmol/L 血清钾 3.5～5.5mmol/L 尿钠 儿童﹤5.0mmol·kg-1/24h 成人130～260mmol·kg-1/24h 尿钾 儿童（1.03±0.7）mmol· kg-1/24h 成人50～102mmol·kg-1/24h 第三十七页，共六十六页。 血清氯的测定方法 1. 库仑滴定法 方法准确，测定的参考方法 2.硫氰酸汞比色法 手工操作，可自动分析仪 3.离子选择电极法 更广泛的氯测定方法 4.硝酸汞滴定法 手工操作，效率低 5.同位素稀释质谱法 决定性方法 特殊昴贵 第三十八页，共六十六页。 血清氯的测定方法 1．滴定法 用标准硝酸汞溶液滴定血清或尿液中的Cl-，Cl-与Hg2+结合生成可溶性但不解离的氯化汞，当滴定到达终点时，标本中全部Cl-与Hg2+结合，过量的Hg2+与指示剂二苯卡巴腙作用生成紫红色络合物。 根据硝酸汞的消耗量可以计算出氯化物的浓度。 第三十九页，共六十六页。 2．比色法 血清氯化物中的氯离子与未离解的硫氰酸汞溶液混合时，氯离子首先与汞结合形成难以解离的氯化汞，并释放出相应量的硫氰酸离子，此离子与试剂中的铁离子结合，生成红色的硫氰酸铁，其色泽与氯的含量呈正比。 血清氯的测定方法 第四十页，共六十六页。 血清氯的测定方法 Cl-与硫氰酸汞反应，其原理如下： Hg(SCN)2 + 2Cl- → HgCl2 +2SCN- 3(SCN)- + Fe3+ → Fe(SCN)3 第四十一页，共六十六页。 血清氯的测定方法 硫氰酸汞比色法测定氯化物操作步骤 加入物(ml) 试剂空白管 标准管 测定管 血 清 - - 0.05 氯标准液 - 0.05 - 空白试剂 0.05 - - 显色液 3.0 3.0 3.0 混匀，置室温10min，以试剂空白管调零， 在460nm波长处比色，分别读取各管吸光度。 第四十二页，共六十六页。 血清氯的测定方法 参考范围 血清(浆)氯化物 96～108 mmol/L； 脑脊液氯化物 120～132 mmol/L； 尿液氯化物 170～250 mmol/24h。 第四十三页，共六十六页。 血清氯的测定方法 方法评价 1．本法对氯离子并非特异，其它一些卤族元素如F－、Br－、I－与之起同样呈色反应。 但在正常人血液中，上述元素含量较低，故可忽略不计。 若接受大量含上述离子药物治疗时，可使血清中氯测定结果偏高。 第四十四页，共六十六页。 血清氯的测定方法 2．显色液的呈色强度与硫氰酸汞和硝酸汞的含量有关。如呈色过强，线性范围在125mmol/L以下，要增加硝酸汞的用量。 呈色太弱，要增加硫氰酸汞的用量，使用前二者要进行调整，使其色泽在460nm波长，10mm光径比色杯测定，吸光度值在0.4左右为宜。 第四十五页，共六十六页。 血清氯的测定方法 3．本法校正曲线不通过零点，但汞离子调控适当，则氯离子在70～140mmol/L范围线性良好(此范围可满足临床需要)。 4．本法呈色温度应不低于20℃