220625 抗gDNA污染MMLV逆转录酶使用手册V1.0(1).pdf

天 CAT#:220625-50 净 低温运输，-20℃保存 沙 系 列 抗gDNA污染MMLV逆转录酶 Anti-gDNA ContaminationMMLV ReverseTranscriptase 使用手册V1.0 江苏天净沙基因诊断技术有限公司 网址：；电话：400-6005850；电邮：order@ 产品及特点 基因组DNA （gDNA）污染是RNA样品中普遍存在的现象。由于污染的gDNA 也会作为后续RT-PCR 中的PCR步骤的模板，因此会严重干扰后续RT-PCR的效率 和准确性，尤其是定量RT-PCR。目前的去除RNA样本中gDNA污染的方法是先用 RNase-freeDNase降解RNA样品中的gDNA，然后再灭活DNase，最后才加入引 物等成分进行RT反应。。此方法分两步进行，否则DNase会降解引物，因此操作不 是非常便捷。为了克服上述方法的缺点，本公司开发出了本产品，它具有下列特点： 1. 在逆转录的同时，同步去除gDNA，不需要额外的加样操作。 2. 高效，可以使RNA样品中残留的gDNA污染 （ng级）降低 5个数量级，绝大 多数都能降低到PCR检测不到的水平。 3. 跟后续PCR和荧光定量PCR兼容，包括基于古细菌DNA聚合酶的PCR （如基 于Pfu DNA聚合酶的PCR）。 4. 本产品规格足够50次20uL体系的抗gDNA污染逆转录反应。 5. 本产品只用于科研。 规格及成分 本产品使用小塑料袋包装 成份 编号 规格 包装材料 5×RT Buffer 220625a 200uL 0.5mL绿盖管 抗gDNA污染MMLV 220625b 50uL 0.5mL红盖管 逆转录酶，200U/uL 使用手册 220625sc 1份 无 运输及保存 低温运输，-20℃保存, 有效期一年。 自备试剂 RNA模板。 使用方法 1. 在离心管中按下表设置抗gDNA污染逆转录反应 （20uL体系）： 成分 样品管 自备的总RNA 50ng-1ug （不超过7uL） 或自备的mRNA模板 5-100ng （不超过7uL） 基因专一引物 或Oligo （dT）18 2uL 或6nt随机引物 dNTP，10mM 1uL 5×RT Buffer 4uL 抗gDNA污染MMLV逆转录酶 1uL